Kaninchen Anti-Maus IgM monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P01872

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der schweren konstanten IgM-Region

• Die schwere konstante Immunglobulin-Mu-Kette (IgM-Schwerkette) wird beim Maus durch das Ighm-Gen kodiert; sie gehört zur Immunglobulin-Superfamilie und repräsentiert den ersten während der B-Zell-Entwicklung exprimierten Antikörper-Isotyp.
• Sie fungiert als konstante Region sowohl membrangebundener B-Zell-Rezeptoren (BCR) als auch sekretierten Immunglobulin M (sIgM). Die Membranform liefert tonische Überlebenssignale und vermittelt die prä-BCR-Signalübertragung, während sekretiertes IgM sich zu Pentameren oder Hexameren zusammensetzt, um Antigene mit hoher Avidität zu binden.
• Sekretiertes IgM (sIgM) vermittelt humorale Effektorfunktionen, indem es die Komplementkomponente C1q rekrutiert, um den klassischen Weg zu initiieren, und indem es den hochaffinen Fc-Rezeptor FCMR auf lymphoiden Zellen bindet, wodurch IgG-Antworten gefördert und gleichzeitig die Selbsttoleranz aufrechterhalten wird. Verwandte Referenzen: PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• IgM ist an der mukosalen Immunität beteiligt: sIgM wird durch den polymeren Immunglobulinrezeptor (PIGR) über mukosale Epithelien transportiert und bildet Antigenkomplexe, die via FCMR zu Antigen-präsentierenden Zellen retrotranszytiert werden. Verwandte Referenzen: PMID:34788614
• Das Protein lokalisiert als Teil des BCR an der Zellmembran und wird auch sekretiert; die Expression wird im Knochenmark und in B-1- und B-2-Zell-Subsets nachgewiesen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-gebundene Glykosylierung und multiple Disulfidbrücken, die für die korrekte Faltung und Multimerisierung essentiell sind; alternatives Spleißen erzeugt membrangebundene und sekretierte Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie das -Konjugat, um die optimale Verdünnung für Ihren Zelltyp und Ihr Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokoll zu bestimmen.
• Schließen Sie eine geeignete Isotypenkontrolle und einen Viabilitätsfarbstoff ein, um tote Zellen von der Analyse auszuschließen.
• Erwägen Sie die Verwendung eines Fc-Rezeptor-Blockierreagenzes, um unspezifische Bindung zu minimieren, insbesondere bei der Arbeit mit myeloischen Zellen.
• Validieren Sie die Färbung mit positiven und negativen Kontrollproben, von denen bekannt ist, dass sie IgM in den erwarteten Mengen exprimieren.

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