Kaninchen anti-Maus IgM Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P01872

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der schweren konstanten Mu-Kette von Ig

• Immunglobulin schwere konstante mu (IgM-Schwerkette-Konstante Region) wird vom Ighm-Gen (Igh-6) kodiert und bildet die konstante Region von IgM-Antikörpern.
• Membrangebundenes IgM (mIgM) ist eine Kernkomponente des B-Zell-Rezeptor (BCR)-Komplexes, es liefert konstitutive tonische Signale, die für das Überleben von B-Zellen essenziell sind, und vermittelt prä-BCR-Signale, die die B-Zell-Selektion und allelische Exklusion regulieren.
• Sekretioniertes IgM (sIgM) multimerisiert hauptsächlich zu Pentameren (gelegentlich Hexameren), was eine hohe Avidität bei der Antigenerkennung verleiht. Natürliches sIgM ist polyreaktiv und erkennt Selbst- und Pathogenstrukturen, während immunologisches sIgM antigenspezifisch ist; beide werden für eine effiziente humorale Immunantwort benötigt. Verwandte Referenzen: PMID:10899913 PMID:28135254 PMID:34788614
• sIgM vermittelt Effektorfunktionen hauptsächlich über Fc-Rezeptoren (z. B. FCMR auf lymphoiden Zellen) und das Komplementsystem. Es rekrutiert C1q, um den klassischen Komplementweg zu initiieren, und fördert zusammen mit C1q und Mannose-bindendem Lektin die Phagozytose apoptotischer Zellen durch Makrophagen, was die Beseitigung autoimmunogener Epitope unterstützt. Verwandte Referenzen: PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• In der mukosalen Immunität wird sIgM über den polymeren Immunglobulinrezeptor (PIGR) durch das Mukosaepithel transportiert, um die Mukosaschleimhaut zu untersuchen. IgM-Antigen-Komplexe können über M-Zellen durch FCMR-vermittelte Retrotranszytose zu antigenpräsentierenden Zellen in mukosalen Lymphgeweben gelangen. Verwandte Referenzen: PMID:34788614
• Subzelluläre Lokalisation: Die sekretierte Form wird in den extrazellulären Raum freigesetzt; die membrangebundene Form befindet sich in der Zellmembran mit einer einzigen Transmembrandomäne.
• Gewebespezifität: Expression im Knochenmark sowie in B-1- und B-2-Zellen (auf Proteinebene).
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Bildung von Disulfidbindungen und Glykosylierung, die für die korrekte Faltung und Multimerisierung entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 105-454 der konstanten Region von Maus-IgM; daher erkennt der Antikörper die konstante Domäne aller Maus-IgM-Unterklassen unabhängig von der Spezifität der variablen Region.
• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie den Antikörper auf Maus-Splenozyten oder B-Zelllinien, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen. Erwägen Sie eine Co-Färbung mit einem Pan-B-Zell-Marker (z. B. Anti-CD19), um die Spezifität zu bestätigen.
• Der -Fluorophor ist ein Farbstoff im Fernrotbereich (Anregung ~650 nm, Emission ~668 nm). Stellen Sie sicher, dass Ihr Zytometer mit einem geeigneten Rotlaser (z. B. 633 nm oder 640 nm) ausgestattet ist.
• Bei intrazellulärer Färbung optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, da das Epitop in der konstanten Region liegt und nach der Permeabilisierung erhalten bleiben kann.
• Verwenden Sie eine Isotyp-Kontrolle (kaninchenmonoklonal konjugiert mit dem gleichen Fluorophor), um unspezifische Bindung zu berücksichtigen.

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