Kaninchen anti-Maus IgE monoklonaler Antikörper für FC - P06336

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der konstanten Region von Maus-IgE

• Die Immunglobulin-schwere konstante Epsilon-Kette (IgE) ist die konstante Region der schweren Kette des Immunglobulins und bildet einen Teil des IgE-Antikörpers. Dieser Antikörper-Isotyp spielt eine zentrale Rolle bei allergischen Reaktionen und Parasiteninfektionen.
• IgE fungiert sowohl als membrangebundener Rezeptor auf B-Zellen als auch als sezernierter Antikörper. Membrangebundenes IgE wirkt als B-Zell-Rezeptor und löst nach Antigenbindung die klonale Expansion und Differenzierung zu Plasmazellen aus. Sezerniertes IgE bindet an hochaffine Fcε-Rezeptoren auf Mastzellen und Basophilen und vermittelt Degranulation und Entzündung.
• Die Verarbeitung der schweren Immunglobulinketten umfasst V(D)J-Rekombination und somatische Hypermutation, die Diversität erzeugen und eine Affinitätsreifung der Antigenbindungsstelle ermöglichen.
• IgE wird in zwei Formen exprimiert: eine membrangebundene Form auf der Oberfläche von B-Lymphozyten und eine sezernierte Form, die von Plasmazellen freigesetzt wird. Die sezernierte Form findet sich in extrazellulären Räumen und Schleimhautgeweben.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die Zellmembran für die membrangebundene Form und den extrazellulären Raum für die sezernierte Form. Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die für seine Struktur und Funktion wesentlich sind.
• Als Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie enthält die konstante Region Immunglobulin-Domänen, die zu Effektorfunktionen und Rezeptorinteraktionen beitragen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 83-421 von Maus-IgE und deckt einen großen Teil der konstanten Region ab. Dieses Design gewährleistet wahrscheinlich die Erkennung von nativem IgE, Benutzer sollten jedoch die Spezifität in ihrer Zielprobe validieren.
• Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie muss ein Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokoll optimiert werden, das für intrazelluläre Proteine geeignet ist. Erwägen Sie, verschiedene Permeabilisierungspuffer und -zeiten zu testen.
• Da IgE in ruhenden B-Zellen auf niedrigem Niveau exprimiert, aber nach Aktivierung hochreguliert wird, kann die Aktivierung von B-Zellen (z. B. mit IL-4 und anti-CD40) den Nachweis verbessern.
• Verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und Kompensation bei der Analyse der -Fluoreszenz. Der Antikörper reagiert mit Maus-IgE; basierend auf dem Immunogen ist keine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies zu erwarten.
• Validieren Sie das Färbemuster in bekannten IgE-exprimierenden Zelllinien oder primären Maus-B-Zellen.

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