Kaninchen anti-Maus Flt3/CD135 monoklonaler Antikörper für FC - Q00342

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Flt3/CD135-Funktion und Lokalisierung

• Der Rezeptor-Tyrosin-Protein-Kinase FLT3 (auch bekannt als CD135, FLK-2, fetale Leberkinase 2) wirkt als Zelloberflächenrezeptor für das Zytokin FLT3LG und reguliert die Differenzierung, Proliferation und das Überleben von hämatopoetischen Vorläuferzellen und dendritischen Zellen.
• Nach Ligandenbindung fördert FLT3 die Phosphorylierung von SHC1, AKT1 und die Aktivierung von MTOR sowie die RAS-abhängige Signalübertragung über MAPK1/ERK2 und MAPK3/ERK1. Es vermittelt auch die Phosphorylierung von FES, FER, PTPN6/SHP, PTPN11/SHP-2, PLCG1 und STAT5A/STAT5B, obwohl die Aktivierung von STAT5 durch wildtypisches FLT3 marginal ist.
• Mutationen, die eine konstitutive Kinaseaktivität verursachen, treiben die Zellproliferation und Apoptoseresistenz über mehrere nachgeschaltete Signalwege an und unterstreichen seine proto-onkogene Rolle.
• Die Gewebeexpression erfolgt hauptsächlich in hämatopoetischen Stamm- und Vorläuferzell-angereicherten Populationen, mit zusätzlichem Nachweis im Gehirn, in der Plazenta und im Hoden.
• Subzellulär lokalisiert FLT3 an der Plasmamembran und im Lumen des endoplasmatischen Retikulums.
• Das Protein weist extrazelluläre Immunglobulin-Domänen, eine einzelne Transmembranhelix und eine intrazelluläre Tyrosinkinase-Domäne auf. Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung und Liganden-induzierte Autophosphorylierung.
• Mit FLT3 assoziierte Schlüsselwörter: ATP-Bindung, Disulfidbindung, Glykoprotein, Immunglobulin-Domäne, Kinase, Membran, Nukleotid-Bindung, Phosphoprotein, Proto-Onkogen, Rezeptor, Transferase, Transmembranhelix, Tyrosin-Protein-Kinase, Ubl-Konjugation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 28–544 der Maus-CD135 (NP_034359.2) umfasst. Ziehen Sie in Betracht, die Reaktivität mit dem nativen Protein auf primären Maus-hämatopoetischen Zellen zu überprüfen.
• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie den Antikörper an Maus-Milz- oder Knochenmarkszellen, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen. Verwenden Sie eine Fc-Rezeptor-Blockierung, um unspezifische Bindung zu minimieren.
• Berücksichtigen Sie bei der Gestaltung von Mehrfarben-Panels die spektralen Eigenschaften des -Fluorophors und führen Sie entsprechende Kompensationskontrollen durch.
• Der Antikörper wird für Mausproben empfohlen; Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht berichtet und sollte bei Bedarf unabhängig getestet werden.
• Validieren Sie die Spezifität durch Vergleich der Färbung in Flt3-Knockout-Modellen oder mit Zelllinien, die CD135 unterschiedlich exprimieren.
• Da FLT3 bei der Erhaltung hämatopoetischer Stammzellen und der Entwicklung dendritischer Zellen eine Rolle spielt, kann dieses Reagenz die Immunphänotypisierung, die Detektion von Leukämiestammzellen oder die Untersuchung der FLT3-ITD-getriebenen Signalübertragung unterstützen.

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