Kaninchen anti-Maus CD97 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q9Z0M6

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Adhäsions-G-Protein-gekoppelten Rezeptors E5 (CD97)

• CD97, auch bekannt als Adhäsions-G-Protein-gekoppelter Rezeptor E5 oder Leukozytenantigen CD97, ist ein Mitglied der Familie der Adhäsions-G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCR), gekennzeichnet durch eine erweiterte N-terminale extrazelluläre Domäne, die EGF-ähnliche Wiederholungen enthält.
• Der kodierte Rezeptor ist ein Glykoprotein, das eine proteolytische Verarbeitung und alternatives Spleißen durchläuft, was zu mehreren Isoformen mit unterschiedlicher Länge der extrazellulären Region führt.
• CD97 fungiert früh nach der Leukozytenaktivierung als dualer Adhäsions- und Signalrezeptor und spielt eine wesentliche Rolle bei der Leukozytenmigration.
• Das Protein lokalisiert sich hauptsächlich an die Zellmembran, kann aber auch sekretiert in den extrazellulären Raum vorkommen.
• In Mausgeweben wird CD97 ubiquitär exprimiert, aber besonders auf hohem Niveau in der Lunge und im Thymus; in der Milz wird es auf den meisten myeloiden Zellen und variablen Anteilen von T-Zellen, B-Zellen und NK-Zellen nachgewiesen, während die Expression im Knochenmark in fast allen myeloiden Zellen gefunden wird und in Erythrozyten weitgehend fehlt.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Phosphorylierung, wobei die Kalziumbindung durch EGF-ähnliche Domänen moduliert wird.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminale extrazelluläre Region (Reste 24–265) von Maus-CD97, was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich Zelloberflächen-CD97 auf lebenden Zellen erkennt und ihn somit für Anwendungen der Durchflusszytometrie geeignet macht.
• Da CD97 auf Leukozytenpopulationen exprimiert wird, kann die Validierung dieses Antikörpers in Maus-Milzzellen oder Knochenmarkszellen helfen, die Detektion von myeloiden und lymphoiden Subpopulationen zu bestätigen.
• Der -Konjugat ermöglicht direktes Einstufen-Färben ohne einen Sekundärantikörper und minimiert den Hintergrund; jedoch sollten eine geeignete Fc-Rezeptor-Blockierung und eine optimale Titrierung empirisch ermittelt werden.
• Angesichts des Molekulargewichts des Proteins von ~90 kDa sollte überprüft werden, ob das Färbemuster mit den erwarteten Zelloberflächenexprimierungsprofilen in den Testproben übereinstimmt.

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