Kaninchen anti-Maus CD69 mAk für Durchflusszytometrie - P37217

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD69-Funktion und -Lokalisierung

• Das frühe Aktivierungsantigen CD69 ist ein transmembraner C-Typ-Lektin-Rezeptor, der nach Aktivierung schnell auf der Oberfläche von Blutplättchen, T-Lymphozyten und NK-Zellen hochreguliert wird und eine zentrale Rolle bei der Homöostase und Signalübertragung von Immunzellen spielt.
• Reguliert die Differenzierung von Th17-Zellen negativ durch eine kohlenhydratabhängige Interaktion mit Galectin-1/LGALS1 auf unreifen dendritischen Zellen, und die Assoziation des cytoplasmatischen Endes mit der JAK3/STAT5-Signalgebung steuert die RORγt-Transkription. Verwandte Referenzen: PMID:20696842
• Fungiert als negativer Regulator der Chemotaxis von Lymphozyten und dendritischen Zellen, indem es als Agonist des Sphingosin-1-Phosphat-Rezeptors 1 (S1PR1) wirkt und die Internalisierung und den Abbau von S1PR1 fördert. Verwandte Referenzen: PMID:16525420
• In Eosinophilen induziert die Bindung von CD69 die IL-10-Produktion durch Aktivierung des ERK1/2-Signalwegs und trägt so zu immunregulatorischen Funktionen bei. Verwandte Referenzen: PMID:38540778
• Fungiert auch als Rezeptor für oxidiertes Low-Density-Lipoprotein (oxLDL) in CD4-T-Lymphozyten, reguliert Entzündungsreaktionen negativ über eine NFAT-abhängige Induktion von PDCD1 und fördert die Konversion von regulatorischen T-Zellen durch Interaktion mit dem S100A8/S100A9-Komplex.
• Lokalisiert sich in der Zellmembran mit einer Single-Pass-Transmembran-Topologie und einer Signalanker-Sequenz; die extrazelluläre Domäne enthält eine Kohlenhydrat-Erkennungsdomäne (CRD) (UniProt: P37217).
• Gewebsspezifität: Wird auf der Oberfläche von aktivierten T-Zellen, B-Zellen, natürlichen Killerzellen, Neutrophilen, Blutplättchen und Eosinophilen nachgewiesen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Bildung von Disulfidbrücken, N-verknüpfte Glykosylierung und Phosphorylierung, wie durch die Schlüsselwörter angezeigt: „Disulfidbindung“, „Glykoprotein“, „Phosphoprotein“.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen (aa 64–199 von Maus-CD69) deckt den Großteil der extrazellulären Kohlenhydrat-Erkennungsdomäne (CRD) ab, die auf der Zelloberfläche exponiert ist; dieses Design gewährleistet wahrscheinlich eine effiziente Erkennung des nativen Proteins in der Durchflusszytometrie.
• Für Anwendungen in der Durchflusszytometrie sollten Sie eine Titrierung des Antikörpers in Betracht ziehen, um die optimale Färbekonzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Geräteeinstellungen zu ermitteln.
• Verwenden Sie geeignete Kontrollen wie isotypengleiche Negativkontrollen, Fluoreszenz-Minus-Eine (FMO)-Kontrollen und Lebend/Tot-Unterscheidungen, um CD69-positive Populationen genau zu gate.
• Validieren Sie die Spezifität durch Färben von Zellen aus CD69-Knockout-Mäusen oder durch Verwendung eines blockierenden Peptids/Proteins, falls verfügbar, um zu bestätigen, dass das Signal antigenabhängig ist.
• Bedenken Sie, dass CD69 ein rasches Aktivierungsmarker ist; der Stimulationszeitpunkt und die Fixierungs/Permeabilisierungsbedingungen müssen möglicherweise je nach biologischem Kontext optimiert werden.

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