Kaninchen anti-Maus CD68 Monoklonaler Antikörper für IF/ICC, FC - P31996

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Macrosialin (CD68)

• Macrosialin (CD68) ist ein stark glykosyliertes Transmembranprotein vom Typ I, das zur LAMP-Familie gehört. Es wird überwiegend in Gewebsmakrophagen und in geringerem Maße in dendritischen Zellen exprimiert.
• Es spielt eine Schlüsselrolle bei den phagozytischen Aktivitäten von Makrophagen und beteiligt sich sowohl am intrazellulären lysosomalen Stoffwechsel als auch an extrazellulären Zell-Zell- und Zell-Pathogen-Interaktionen.
• CD68 kann an gewebs- und organspezifische Lektine oder Selectine binden und die Ansiedelung von Makrophagen-Subpopulationen an bestimmten Stellen erleichtern.
• Die schnelle Rekyalisierung von CD68 von Endosomen und Lysosomen zur Zellmembran ermöglicht es Makrophagen, über selectinhaltige Substrate oder andere Zellen zu kriechen.
• Das Protein ist an Endosomenmembranen, Lysosomenmembranen und der Zellmembran lokalisiert, was mit seiner endozytischen Transportfunktion übereinstimmt.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, das Protein weist Disulfidbindungen und umfangreiche Glykosylierung auf, die zu seiner strukturellen Stabilität und Immunerkennung beitragen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Region (Aminosäuren 21-291) der Maus CD68, was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich ein exponiertes Epitop erkennt, das für Oberflächenfärbungen in Durchflusszytometrie und Immunfluoreszenzanwendungen geeignet ist.
• Für die Durchflusszytometrie ist die Oberflächenfärbung lebender Zellen ggf. ohne Permeabilisierung durchführbar, es wird jedoch empfohlen, die Färbemuster sowohl in nicht permeabilisierten als auch permeabilisierten Makrophagenproben zu validieren.
• In der Immunfluoreszenz/Immunozytochemie ermöglichen milde Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen (z. B. 4 % PFA gefolgt von 0,1 % Triton X-100) die Detektion des gesamten zellulären CD68-Pools, einschließlich endosomaler/lysosomaler Kompartimente.
• Erwägen Sie die Verwendung dieses Antikörpers zur Identifizierung von Makrophagenpopulationen in murinen Geweben wie Milz und Lymphknoten mit geeigneten Isotypkontrollen.
• Vermeiden Sie aufgrund der Farbstoffkonjugation Gefrier-Auftau-Zyklen und schützen Sie den Antikörper vor längerer Lichteinwirkung, um die Fluoreszenzintensität zu erhalten.

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