Kaninchen-anti-Maus-CD45-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – P06800

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD45

• CD45 ist eine rezeptortypische Tyrosin-Protein-Phosphatase C, auch bekannt als gemeinsames Leukozytenantigen (L-CA), Lymphozytenantigen 5 (Ly-5) und T200.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der T-Zell-Aktivierung über den Antigenrezeptor und wirkt nach der Bindung an DPP4 als positiver Regulator der T-Zell-Koaktivierung.
• Die erste der beiden intrazellulären Phosphatasedomänen besitzt enzymatische Aktivität, während die zweite die Substratspezifität moduliert.
• CD45 ist hauptsächlich an der Zellmembran, in Membranrafts und an der immunologischen Synapse lokalisiert.
• Es interagiert mit wichtigen Signalmolekülen wie SKAP1, FYN und LYN und dephosphoryliert diese, wodurch nachgeschaltete Signalwege moduliert werden.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, die zu Proteinen mit unterschiedlichen Molekulargewichten führen, entsprechend den beobachteten Spezies mit 130 kDa, 140 kDa und 144 kDa.
• Das Protein ist stark glykosyliert und wird phosphoryliert, wodurch es als Glykoprotein und Phosphoprotein klassifiziert wird.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Region (Aminosäuren 26–566), was darauf hindeutet, dass der Antikörper ein extrazelluläres Epitop erkennt und sich somit für die Durchflusszytometrie an lebenden Zellen eignet.
• Titrieren Sie den Antikörper für die Durchflusszytometrie, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihre spezifische Zellpopulation zu bestimmen.
• Berücksichtigen Sie bei der Validierung der Spezifität das Vorhandensein von CD45-Isoformen mit unterschiedlichen Molekulargewichten. Bestätigen Sie das erwartete Bandenmuster in relevanten Zelllysaten, wenn Sie den Antikörper für den Western Blot einsetzen möchten.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und stellen Sie eine korrekte Kompensation sicher, wenn Sie den -Fluorophor in mehrfarbigen Durchflusszytometrie-Panels einsetzen.

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