Kaninchen anti-Maus CD28 monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P31041

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD28-Funktion und Lokalisierung

• CD28 ist ein T-Zell-spezifisches Oberflächenglykoprotein, das als kostimulatorischer Rezeptor fungiert, der für die T-Zell-Aktivierung, -Proliferation, -Überleben und die Aufrechterhaltung der Immunhomöostase essentiell ist (PubMed:7688139). Verwandte Referenzen: PMID:7688139
• Es wirkt als Verstärker von T-Zell-Rezeptor (TCR)-Signalen und übermittelt einzigartige intrazelluläre Signale, die das Genexpressionsprogramm von T-Zellen verändern.
• Nach Bindung seiner Liganden CD80 (B7-1) oder CD86 (B7-2) verstärkt CD28 die Produktion mehrerer Zytokine, am prominentesten IL-2, sowohl in CD4+ als auch in CD8+ T-Zell-Subsets.
• Die Signalübertragung beinhaltet die Rekrutierung der Proteinkinase C-theta (PRKCQ) und GRB2, was über PI3K/Akt-abhängige und -unabhängige Wege zur NF-kappa-B-Aktivierung führt.
• In Verbindung mit TCR/CD3-Ligation und CD40L-Kostimulation fördert CD28 die Produktion von IL-4 und IL-10 in T-Zellen.
• CD28 ist in der Zellmembran lokalisiert und ist ein Single-Pass Typ I Transmembranprotein, das eine extrazelluläre Immunglobulin-ähnliche V-Typ-Domäne enthält.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung und Phosphorylierung, die seine Oberflächenexpression und Signalübertragungsfunktionen regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 20–149) umfasst die extrazelluläre Domäne, wodurch dieser monoklonale Antikörper für den Nachweis von nativem CD28 auf der Zelloberfläche mittels Durchflusszytometrie geeignet ist.
• Für FC titrieren Sie den -konjugierten Antikörper, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen, und schließen Sie eine Isotypenkontrolle ein, um unspezifische Bindung zu beurteilen.
• hat Anregungs-/Emissionsmaxima bei ~650/665 nm; sorgen Sie für eine ordnungsgemäße Kompensation bei der Kombination mit anderen Fluorophoren (z.B. PE, FITC) in Multifarben-Panels.
• Validieren Sie die Färbung an bekannten CD28-positiven Maus-T-Zelllinien oder primären aktivierten Milzzellen und erwägen Sie Fixierung/Permeabilisierung, wenn auch intrazelluläre Ziele analysiert werden.

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