Kaninchen anti-Maus CD274/PD-L1 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q9EP73

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD274/PD-L1

• CD274 (PD-L1), auch bekannt als B7-H1, ist ein Typ-I-Transmembranprotein, das zur Immunglobulin-Superfamilie gehört.
• Als Ligand für den inhibitorischen Rezeptor PDCD1 (PD-1) spielt es eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung der Immuntoleranz durch die Begrenzung der T-Zell-Effektorantworten. Verwandte Referenzen: PMID:11238124
• Durch einen noch nicht identifizierten aktivierenden Rezeptor kann CD274 auch T-Zell-Subpopulationen kostimulieren, die vorwiegend IL-10 produzieren. Verwandte Referenzen: PMID:11015443 PMID:12719480
• In der Tumor-Mikroumgebung wird der PD-1/PD-L1-Weg genutzt, um die Anti-Tumor-Immunität abzuschwächen, die CTL-Effektorfunktion zu hemmen und das Tumorüberleben zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:12218188 PMID:27281199
• CD274 lokalisiert an der Zellmembran und zirkuliert auch durch Membranen von frühen und rezyklierenden Endosomen.
• Es ist stark in Herz, Thymus, Skelettmuskel und Lunge exprimiert sowie auf aktivierten dendritischen Zellen, B-Zellen und Makrophagen; es findet sich auch auf vielen Tumorzelllinien lymphoiden Ursprungs.
• Strukturelle Merkmale umfassen eine Immunglobulin-V-ähnliche Domäne, eine Transmembranhelix, Disulfidbrücken und N-verknüpfte Glykosylierung; es kann auch einer Ubiquitinierung unterliegen.
• Funktionell ist es an der adaptiven Immunität beteiligt und wirkt als Rezeptor, der Immunreaktionen moduliert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aa 19-235 von Maus-CD274/PD-L1) entspricht der extrazellulären Domäne, von der vorhergesagt wird, dass sie Antikörper generiert, die das native Zelloberflächenprotein in der Durchflusszytometrie erkennen.
• Als vorkonjugierter -Antikörper ermöglicht er eine direkte Detektion ohne sekundäre Färbung; titrieren Sie den Antikörper für ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis in Ihrem spezifischen experimentellen System.
• Verwenden Sie geeignete Vitalitätsfarbstoffe, um tote Zellen auszuschließen, da unspezifische Bindungen auftreten können.
• Validieren Sie das Färbemuster unter Verwendung bekannter positiver Kontrollen (z. B. aktivierte Maus-T-Zellen, dendritische Zellen oder PD-L1-exprimierende Tumorzelllinien) und einer Isotyp-Kontrolle.
• Für die intrazelluläre Färbung oder den Detektion in permeabilisierten Zellen, überprüfen Sie, ob das Epitop unter Fixierungs-/Permeabilisierungsbedingungen erhalten bleibt.

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