Kaninchen-anti-Maus-CD25-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – P01590

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD25

• CD25 ist die Alpha-Untereinheit des Interleukin-2-Rezeptors (IL-2R), auch als p55 bezeichnet, und wird bei der Maus vom Il2ra-Gen kodiert.
• Es spielt eine zentrale Rolle bei der Regulation der Immuntoleranz, indem es die Aktivität regulatorischer T-Zellen (Tregs) steuert, wobei Tregs die Aktivierung und Expansion autoreaktiver T-Zellen unterdrücken.
• Als Rezeptor für IL-2 ist CD25 zusammen mit den Beta- und Gamma-Ketten Bestandteil des hochaffinen IL-2-Rezeptorkomplexes und vermittelt Signalwege, die für die Proliferation und Homöostase von Lymphozyten entscheidend sind.
• CD25 ist ein Transmembranprotein vom Typ I, das hauptsächlich auf der Plasmamembran lokalisiert ist, was seiner Funktion als Zelloberflächenrezeptor entspricht.
• Die extrazelluläre Region enthält zwei Sushi-Domänen (CCP/SCR) und wird durch N-Glykosylierung sowie Disulfidbrücken modifiziert, die zur strukturellen Stabilität und Ligandeninteraktion beitragen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 22–236) von CD25 der Maus, was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich nativ auf der Zelloberfläche exprimiertes CD25 erkennt.
• Dieses ABflo-450-Konjugat wurde für die Durchflusszytometrie (FC) entwickelt und ermöglicht den direkten Nachweis von CD25 ohne Sekundärfärbung. Geeignete Isotypkontrollen und Viabilitätsfarbstoffe sollten berücksichtigt werden, um eine spezifische Färbung sicherzustellen.
• Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren Zelltyp und Ihre experimentellen Bedingungen zu bestimmen, und schließen Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. aktivierte T-Zellen) sowie Negativkontrollen ein.
• Überprüfen Sie bei Mehrfarben-Panels die minimale Überlappung und den erforderlichen Kompensationsbedarf, insbesondere wenn ABflo 450 mit anderen Fluorophoren im Kanal des violetten Lasers kombiniert wird.

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