Kaninchen anti-Maus CD22 Monoklonaler Antikörper für IF-P und FC - P35329

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD22

• CD22 ist ein B-Zell-Rezeptor und das am stärksten exprimierte sialinsäurebindende immunglobulin-ähnliche Lektin (Siglec) auf B-Zellen. Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Differenzierung, Antigenpräsentation und dem Trafficking zum Knochenmark (PubMed:7533044, PubMed:9016707). Zugehörige Referenzen: PMID:7533044, PMID:9016707
• Es bindet α2,6-verknüpfte Sialinsäurereste an Oberflächenmolekülen wie CD22 selbst, CD45 und IgM in cis-Konfiguration und kann über Wechselwirkungen in trans auch als Adhäsionsmolekül wirken.
• CD22 fungiert als inhibitorischer Korezeptor auf B-Zellen, wo es die B-Zell-Rezeptor (BCR)-Signalgebung negativ reguliert, indem es die Kalziummobilisierung und zelluläre Aktivierung hemmt (PubMed:9016707). Zugehörige Referenzen: PMID:9016707
• Nach BCR-Bindung wird das Immunorezeptor-Tyrosin-basierte inhibitorische Motiv (ITIM) von CD22 durch die Src-Kinase LYN phosphoryliert, was zur Rekrutierung der Protein-Tyrosin-Phosphatase PTPN6 (SHP-1) und zur Abschwächung der BCR-Signalgebung führt.
• Wenn die durch CD22 vermittelte negative Signalgebung ausreichend stark ist, kann sie Apoptose in B-Zellen induzieren.
• CD22 ist auf der Zellmembran lokalisiert und wird spezifisch in B-Lymphozyten exprimiert.
• Das Protein unterliegt alternatives Spleißen und wird unter Schlüsselwörtern wie Glykoprotein, Phosphoprotein, Disulfidbindung und immunglobulindomänenhaltiges Protein klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser -konjugierte Antikörper ist für den direkten Nachweis in Immunfluoreszenz (IF-P) und Durchflusszytometrie (FC) konzipiert. Für IF-P sollten Sie Fixierung und Permeabilisierung optimieren, um die Membranlokalisation zu erhalten. Eine empfohlene Startverdünnung für FC liegt typischerweise zwischen 1:50 und 1:200, aber Endnutzer sollten die Verdünnung für ihr spezifisches Experimentalsystem titrieren.
• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 22-151) und zielt auf die N-terminale Region von Maus CD22 ab. Diese Region umfasst die V-set Ig-ähnliche Domäne, die an der Sialinsäurebindung beteiligt ist, was darauf hindeutet, dass der Antikörper den Rezeptor in seiner nativen Konformation erkennen kann.
• Validieren Sie die Spezifität bei Verfügbarkeit mit CD22-Knockout- oder Knockdown-Modellen, um eine minimale Off-target-Bindung in Ihren Assays zu bestätigen.
• Da CD22 ein B-Zell-spezifischer Marker ist, stellen Sie sicher, dass die entsprechende Zellpopulation in Ihren Proben vorhanden ist. Für die Durchflusszytometrie schließen Sie geeignete Isotypkontrollen und Fc-Rezeptor-Blockierungsschritte ein.

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