Kaninchen anti-Maus CD14 monoklonaler Antikörper für FC - P10810

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD14-Funktion und -Lokalisierung

• CD14 ist ein Monozyten-Differenzierungsantigen und ein myeloidezellspezifisches leucinreiches Glykoprotein, das zur Familie der leucinreichen Wiederholungen (LRR) gehört und über einen Glycosylphosphatidylinositol (GPI)-Rest an der Membran verankert ist.
• Fungiert als Korezeptor für bakterielles Lipopolysaccharid (LPS), bindet monomeres LPS zusammen mit LBP und liefert es an den LY96/TLR4-Komplex, um angeborene Immunantworten einzuleiten. Verwandte Referenzen: PMID:16148141
• Die LPS-CD14-Signalgebung verläuft über den MyD88/TIRAP/TRAF6-Weg, was zur Aktivierung von NF-kappa-B, Zytokinsekretion und Entzündungsreaktionen führt. Verwandte Referenzen: PMID:15895089, PMID:8612135
• Fungiert auch als Korezeptor für bakterielle Lipopeptide: synergisiert mit TLR2:TLR6 für diacylierte Lipopeptide und mit TLR2:TLR1 für triacylierte Lipopeptide; die Signalgebung erfolgt von der Zelloberfläche, gefolgt von einer lipid-raft-abhängigen Verlagerung zum Golgi-Apparat.
• Dient als Hilfsrezeptor für M. tuberculosis-Lipoproteine LprA, LprG und LpqH, arbeitet mit TLR2 und TLR1 zusammen, um die Funktionen von antigenpräsentierenden Zellen zu modulieren. Verwandte Referenzen: PMID:19362712
• Lokalisiert in der Zellmembran, Membran-Rafts und dem Golgi-Apparat; eine lösliche sezernierte Form wird ebenfalls gebildet.
• Wird auf Proteinebene in peritonealen Makrophagen und Lungenalveolären/dendritischen Makrophagen exprimiert. Verwandte Referenzen: PMID:8612135, PMID:19362712
• Post-translational modifiziert: enthält eine GPI-Anker-Bindungsstelle, Disulfidbrücken und N-verknüpfte Glykosylierung, was zu seiner strukturellen Stabilität und Funktion beiträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihr Zellsystem zu bestimmen; typische Startverdünnungen reichen von 1:50 bis 1:200.
• Verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und erwägen Sie eine Fc-Rezeptor-Blockierung, um unspezifische Bindungen zu reduzieren, insbesondere bei der Arbeit mit myeloiden Zellen.
• Wenn eine intrazelluläre Färbung erforderlich ist, fixieren und permeabilisieren Sie die Zellen nach der Oberflächenfärbung; beachten Sie, dass CD14 hauptsächlich an der Oberfläche exprimiert wird, aber nach Ligandenbindung internalisieren kann.
• Validieren Sie die Färbung an bekannten CD14-positiven Populationen, wie z. B. peritonealen Makrophagen oder Lungenalveolären Makrophagen, um die Spezifität und Empfindlichkeit zu bestätigen.

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