Kaninchen-anti-Maus-CD126/IL-6Rα-Ketten-mAb - P22272

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von IL-6Rα

• IL-6Rα (Interleukin-6-Rezeptor-Untereinheit alpha) ist ein transmembranäres Glykoprotein vom Typ I, das zur Familie der Typ-I-Zytokinrezeptoren gehört und eine extrazelluläre Region mit immunglobulinähnlichen Domänen sowie ein konserviertes WSXWS-Motiv aufweist.
• Es dient als Bindungsuntereinheit mit niedriger Affinität für IL-6 und kann nicht unabhängig Signale weiterleiten. Die Bildung des hochaffinen Komplexes mit IL6ST/gp130 ist erforderlich, um nachgeschaltete JAK/STAT- und MAPK-Signalwege zu aktivieren.
• Die klassische IL-6-Signalübertragung, die durch membrangebundenes IL-6Rα vermittelt wird, wirkt überwiegend regenerativ und entzündungshemmend; seine Expression ist weitgehend auf Hepatozyten und bestimmte Subpopulationen von Immunzellen beschränkt.
• Lösliches IL-6Rα (sIL6R), das durch proteolytische Spaltung oder alternatives Spleißen entsteht, bildet mit IL-6 Komplexe und ermöglicht die trans-Signalübertragung über gp130 auf Zellen, denen endogenes IL-6Rα fehlt. Dieser entzündungsfördernde Mechanismus ist zentral für chronische Entzündungserkrankungen (PubMed:11113088; aufgrund von Ähnlichkeiten). Zugehörige Referenzen: PMID:11113088
• Durch Cluster-Signale treiben membrangebundene IL-6/IL-6Rα-Komplexe auf dendritischen Zellen die Polarisierung naiver CD4+-T-Zellen in Richtung eines Th17-Phänotyps voran und verbinden dadurch die angeborene mit der adaptiven Immunität (PubMed:27893700). Zugehörige Referenzen: PMID:27893700
• sIL6R ist nach einer Verletzung für den Schutz der Leber und die Leberregeneration erforderlich (PubMed:11113088), und die trans-Signalübertragung im zentralen Nervensystem ist entscheidend für die Regulation der Energie- und Glukosehomöostase (PubMed:28402851). Zugehörige Referenzen: PMID:11113088 PMID:28402851
• Das Protein wird durch N-glykosylierung modifiziert und enthält konservierte Disulfidbrücken, die für die korrekte Faltung, Stabilität und Ligandeninteraktion essenziell sind.
• IL-6Rα wird auf dendritischen Zellen in lymphatischen Geweben exprimiert und liegt im Liquor in löslicher Form vor, was seine duale Rolle bei der Immunüberwachung und der neuroimmunologischen Kommunikation widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die gesamte extrazelluläre Region (AS 20–357). Daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich ein Epitop innerhalb der Ligandenbindungsdomäne und kann sowohl membrangebundenes als auch lösliches IL-6Rα erkennen.
• Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen. Verwenden Sie Isotypkontrollen und eine Blockierung der Fc-Rezeptoren, um den Hintergrund zu minimieren.
• Stellen Sie sicher, dass Ihr Durchflusszytometer mit einem geeigneten Laser (z. B. 633–647 nm) und Filter (z. B. 660/20) für den -Fluorophor ausgestattet ist.
• Validieren Sie den Antikörper in relevanten Populationen von Mauszellen, beispielsweise Splenozyten oder aus Knochenmark gewonnenen dendritischen Zellen, die bekanntermaßen IL-6Rα exprimieren.
• Berücksichtigen Sie, dass der Antikörper die IL-6-Bindung neutralisieren oder blockieren kann, wenn sich sein Epitop mit der Zytokinbindungsstelle überschneidet. Eine Vorinkubation mit rekombinantem IL-6 kann helfen festzustellen, ob die Färbung beeinflusst wird.

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