Kaninchen anti-Maus CD117/c-Kit monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P05532

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD117/c-Kit Funktion und Lokalisierung

• CD117/c-Kit ist ein Tyrosin-Protein-Kinase-Rezeptor für den Stammzellfaktor (SCF/KITLG), kodiert durch das Kit-Gen. Mehrere Isoformen zeigen unterschiedliche Gewebeverteilungen.
• Nach SCF-Bindung aktiviert KIT nachgeschaltete Signalkaskaden, einschließlich PI3K/AKT, RAS/MAPK und JAK/STAT-Wege, die Zellüberleben, Proliferation, Hämatopoese und Gametogenese regulieren.
• Die Rezeptorstruktur umfasst fünf extrazelluläre Immunglobulin-ähnliche Domänen, eine einzelne Transmembranhelix und eine intrazelluläre Tyrosinkinase-Domäne.
• KIT ist primär ein Zellmembranrezeptor; er wird nach Aktivierung internalisiert und kann vorübergehend im Zytoplasma lokalisiert sein.
• Autophosphorylierung an Tyrosinresten löst die nachgeschaltete Signalgebung aus, während Ubiquitinierung den Rezeptorabbau und die Signalabschwächung reguliert.
• Isoformen 1 und 2 werden im Knochenmark, in Spermatogonien und Spermatozyten exprimiert; Isoform 3 wird in späteren Keimzellstadien nachgewiesen. Isoform 1 ist weit verbreitet in hämatopoetischen Geweben exprimiert.
• Als Proto-Onkogen ist KIT mit onkogenen Prozessen assoziiert, wenn es dysreguliert ist; seine Mutationen oder Überexpression sind mit verschiedenen Malignomen verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieses -Konjugat ist für die direkte Durchflusszytometrie an Mausproben validiert. Für andere Anwendungen (z.B. IHC, WB) werden Optimierung und unabhängige Validierung empfohlen.
• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (aa 25–523), wodurch der Antikörper für die Oberflächenfärbung lebender Zellen ohne Permeabilisierung geeignet ist.
• Anregung und Detektion: kann durch einen roten Laser (633–640 nm) angeregt und im APC-Kanal detektiert werden. Sorgen Sie für eine ordnungsgemäße Kompensation in Mehrfarben-Panels.
• Zur Verbesserung der Lebend/Tot-Unterscheidung erwägen Sie eine Ko-Färbung mit einem Lebensfähigkeitsfarbstoff, da CD117 in apoptotischen Zellen abgespalten oder internalisiert werden kann.
• Für quantitative Durchflusszytometrie schließen Sie eine geeignete Isotypenkontrolle ein und führen Sie eine Antikörpertitration durch, um optimale Färbekonzentrationen zu bestimmen.

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