Kaninchen anti-Megalin/LRP2 monoklonaler Antikörper für IF-P und FC (intra) - P98164

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Megalin/LRP2 Funktion und Lokalisierung

• Megalin (LRP2) ist ein Typ-I-Transmembran-Glykoprotein von ca. 521 kDa, das zur Familie der LDL-Rezeptoren (Low-Density Lipoprotein) gehört und durch mehrere Ligandenbindungs-Wiederholungen, EGF-ähnliche Domänen und einen kurzen zytoplasmatischen Schwanz charakterisiert ist.
• Es fungiert als multiligandischer endozytischer Rezeptor, der die Internalisierung und lysosomale Degradation diverser Liganden vermittelt, einschließlich Lipoproteine, Vitaminträger-Komplexe, Hormone, Enzyme und Arzneimittel, oft in Partnerschaft mit Cubilin (CUBN).
• In der Niere ist Megalin entscheidend für die tubuläre Reabsorption filtrierter Proteine; es vermittelt die Aufnahme von metallotionein-gebundenen Schwermetallen (z. B. Cadmium, Quecksilber), dem anti-apoptotischen Protein Survivin/BIRC5, Vitamin D3/GC-DBP-Komplexen, Myoglobin und Matrixmetalloproteinasen und erhält so die Nierenfunktion. Verwandte Referenzen: PMID:15126248, PMID:23825075
• Im zentralen Nervensystem transportiert Megalin Leptin über die Blut-Hirn-Schranke, beteiligt sich an der Clearance und Transzytose von Sonic Hedgehog (SHH) und erleichtert die Folsäureaufnahme, die für den Neuralrohrverschluss essenziell ist; es vermittelt auch die Clearance von Beta-Amyloid und unterstützt die Neurogenese durch Modulation der BMP-Signalgebung.
Megalin ist primär an der apikalen Plasmamembran polarisierter resorptiver Epithelien, wie z. B. renaler proximaler Tubuluszellen, lokalisiert und unterzieht sich einer Clathrin-vermittelten Endozytose in Endosomen.
• Die Gewebeexpression ist prominent in der Plazenta (Zytotrophoblasten im ersten und dritten Trimester) und den renalen proximalen Tubuli, wie durch Analysen auf Proteinebene bestätigt wurde. Verwandte Referenzen: PMID:27798286
• Zusätzliche physiologische Rollen umfassen die Aufnahme von SHBG-gebundenen Androgenen/Östrogenen in reproduktiven Geweben, die Aufrechterhaltung der auditorischen Funktion und die Entwicklung des embryonalen Herzens.
• Das Protein unterliegt Kalziumbindung, Phosphorylierung und extensiver Glykosylierung, und Mutationen in LRP2 sind mit dem Donnai-Barrow-Syndrom und Taubheit assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umspannt die C-terminale zytoplasmatische Region (aa 4446–4655), was die Detektion der Volllänge und bestimmter verarbeiteter Formen von LRP2 in denaturiertem und nativem Zustand ermöglichen kann.
• Für die Immunfluoreszenz an Paraffin-eingebetteten Geweben (IF-P) sollte ein hitzeinduzierter Antigen-Retrieval-Schritt mit einem Citrat-Puffer pH 6,0 für eine optimale Epitop-Exposition in Betracht gezogen werden.
• Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie (FC) sind Fixierung und Permeabilisierung zwingend; Pilot-Titrationen (z. B. 0,5–5 µg/mL) im relevanten Zelltyp werden empfohlen, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen.
• Obwohl für IF-P und FC validiert, kann dieser monoklonale Antikörper auch in anderen Anwendungen funktionieren; eine unabhängige Verifizierung wird empfohlen, insbesondere angesichts der großen Größe und komplexen Struktur von Megalin.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Megalin deutet auf konservierte Epitopsequenzen hin; Benutzer sollten jedoch die Reaktivität in ihrem spezifischen Gewebe- oder Zellsystem bestätigen.

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