Kaninchen anti-Human/Affe Ki67 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie (intrazellulär) - P46013

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Ki67

• Das Proliferationsmarker-Protein Ki-67, kodiert durch das MKI67-Gen, auch bekannt als Antigen KI-67, MIB-1, KIA und PPP1R105.
• Dient als mitotischer Chromosomen-Organisator: Er fungiert während der frühen Mitose als Chromosomen-Repellent, um die individuelle Chromosomendispersion aufrechtzuerhalten, und während der späten Mitose als Chromosomen-Attraktant, um die Chromosomen-Clusterbildung zu fördern (PubMed:27362226, PubMed:32879492, PubMed:35513709). Zugehörige Referenzen: PMID:27362226 PMID:32879492 PMID:35513709
• Bildet eine ausgedehnte bürstenartige Struktur auf der Chromosomenoberfläche, die eine sterische und elektrostatische Barriere bietet, welche den Zusammenbruch der Chromosomen verhindert; während der Anaphase löst die Dephosphorylierung eine RNA-abhängige Flüssig-Flüssig-Phasentrennung aus, um die Chromosomen-Clusterbildung zu fördern (PubMed:27362226, PubMed:32879492, PubMed:39153474). Zugehörige Referenzen: PMID:27362226 PMID:32879492 PMID:39153474
• Bindet DNA mit einer Präferenz für supergecoilte und AT-reiche DNA und bindet während der Anaphase auch prä-ribosomale RNA, was die Phasentrennung erleichtert (PubMed:10878551, PubMed:28935370, PubMed:39153474). Zugehörige Referenzen: PMID:10878551 PMID:28935370 PMID:39153474
• Subzelluläre Lokalisation: Verbleibt während der Interphase im Nukleolus; verlagert sich während der Mitose auf die Oberfläche der mitotischen Chromosomen.
• Unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Funktion und zellzyklusabhängige Dynamik regulieren.
• Aufgrund seines zellzyklusabhängigen Expressionsmusters als Proliferationsmarker ausgewiesen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das der C-terminalen Region (AS 2271-2370) des humanen Ki67 entspricht. Stellen Sie sicher, dass das Epitop in Ihrem intrazellulären Färbeprotokoll zugänglich ist.
• Dieser Antikörper ist direkt mit für die einstufige intrazelluläre Durchflusszytometrie konjugiert. Optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für Ihren Zelltyp, um das Ki67-Epitop zu erhalten und gleichzeitig den Zugang des Antikörpers zum Zellkern zu gewährleisten.
• Die Kreuzreaktivität mit Cynomolgus-Affen (Macaca fascicularis) deutet auf eine Eignung für Studien an nicht-menschlichen Primaten hin; validieren Sie die Kreuzreaktivität in Ihrem spezifischen Modellsystem.
• Ki67 ist ein großes Kernprotein (vorhergesagtes Molekulargewicht ~359 kDa), daher sollten Sie eine ausreichende Permeabilisierung sicherstellen und die Verwendung einer Kerngegenfärbung für das Gating in Betracht ziehen.
• Für eine quantitative Proliferationsanalyse kombinieren Sie den Antikörper mit einem DNA-Farbstoff (z. B. Propidiumiodid) in einem bivariaten Durchflusszytometrie-Assay.

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