Kaninchen-anti-humaner/-affenartiger Ki67-mAk – P46013

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Ki67

• Das Proliferationsmarkerprotein Ki-67 (Antigen KI-67) ist ein vom MKI67-Gen kodiertes Kernprotein und wird weithin als Marker für die Zellproliferation eingesetzt.
• Während der frühen Mitose verlagert sich Ki-67 von den Nukleoli auf die Chromosomenoberfläche, wo es ausgedehnte bürstenartige Strukturen bildet, die Chromosomen physisch voneinander trennen und dadurch verhindern, dass sie durch sterische und elektrostatische Abstoßung zu einer einzigen Chromatinmasse zusammenfallen. Zugehörige Referenzen: PMID:27362226
• Mit dem Fortschreiten der Mitose zur Anaphase löst die Dephosphorylierung von Ki-67 einen funktionellen Wechsel aus: Die Bürstenstruktur kollabiert, und Ki-67 fördert die Clusterbildung der Chromosomen sowie den Ausschluss zytoplasmatischer Partikel aus dem entstehenden Zellkern. Zugehörige Referenzen: PMID:32879492, PMID:39153474
• Ki-67 kann auf Chromosomenoberflächen eine Flüssig-Flüssig-Phasentrennung durchlaufen, die durch die Bindung an prä-mature ribosomale RNAs vermittelt wird und während der späten Mitose die Koaleszenz benachbarter Chromosomen fördert. Zugehörige Referenzen: PMID:28935370, PMID:39153474
• Das Protein weist DNA-Bindungsaktivität auf, mit einer Präferenz für superhelikale und AT-reiche DNA. Zugehörige Referenzen: PMID:10878551
• Die subzelluläre Lokalisation ist dynamisch: Während der Interphase befindet sich Ki-67 hauptsächlich in den Nukleoli und ist während der gesamten Mitose mit den Chromosomen assoziiert.
• Ki-67 unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, darunter Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine mitotischen Funktionen regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid aus der C-terminalen Region (AS 2271–2370) erzeugt. Stellen Sie sicher, dass das Epitop in Ihrem Nachweissystem zugänglich ist, insbesondere unter den für die intrazelluläre Durchflusszytometrie verwendeten Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen.
• Optimieren Sie bei der intrazellulären Färbung die Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte gemäß Standardprotokollen, um ein ausreichendes Eindringen des Antikörpers und eine zuverlässige Antigenerkennung zu gewährleisten.
• Die Ki-67-Expression ist vom Zellzyklus abhängig. Beziehen Sie geeignete Kontrollen ein, beispielsweise serumstarvierte oder nicht proliferierende Zellen, um die Spezifität in Ihrem experimentellen Modell zu validieren.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 319–359 kDa. Bestätigen Sie die Bandengröße gegebenenfalls durch eine denaturierende Gelelektrophorese und beachten Sie, dass auch proteolytische Fragmente auftreten können.

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