Kaninchen anti-Human/Affe IgM mAb - P01871-1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IgM-Funktion und -Lokalisierung

• Isoform 1 von Immunglobulin schwer konstant mu (IGHM), auch bekannt als Ig mu chain C region, bildet die konstante Region (Fc) von sezernierten IgM-Antikörpern und stellt die strukturelle Basis für Effektorfunktionen bereit.
• Sezerniertes IgM multimerisiert zu hochmolekularen Polymeren, vorwiegend Pentameren und gelegentlich Hexameren, und sorgt so für Multivalenz und hochaffine Antigenbindung (PubMed:32029689, PubMed:37095205). Verwandte Referenzen: PMID:32029689 PMID:37095205
• Natürliches Serum-IgM (natürliches IgM) ist polyreaktiv und erkennt konservierte Selbst- und Pathogenmotive, während Immun-IgM nach Pathogenexposition produziert wird und antigenspezifisch ist; beide sind für eine effektive humorale Immunantwort unerlässlich.
• IgM vermittelt die Aktivierung des klassischen Komplementwegs durch Rekrutierung von C1q und erleichtert zusammen mit C1q und Mannose-bindendem Lektin die Makrophagenphagozytose von apoptotischen Zellen, was bei der Beseitigung potenzieller Autoimmunepitope hilft (PubMed:12847249, PubMed:19006321, PubMed:28230186). Verwandte Referenzen: PMID:12847249 PMID:19006321 PMID:28230186
• Durch hochaffine Bindung an den Fc-Rezeptor FCMR auf lymphoiden Zellen fördert sIgM robuste neutralisierende IgG-Antworten, während es die Selbsttoleranz aufrechterhält.
• Bei der mukosalen Immunität wird IgM durch den polymeren Immunglobulinrezeptor (PIGR) über Epithelzellen transzytotiert, um sekretorisches IgM zu bilden, das die mukosalen Oberflächen scannt; Antigen-gebundenes IgM wird über FCMR auf M-Zellen retrotranszytotiert zur Lieferung an antigenpräsentierende Zellen (PubMed:32029689). Verwandte Referenzen: PMID:32029689
• Das Protein wird sezerniert und hat ein Molekulargewicht von ca. 49,4 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die CH2–CH3-Region der IgM-Konstantdomäne, die bei Primaten hoch konserviert ist; eine Kreuzreaktivität mit IgM des Javaneraffen ist bestätigt, aber Tests in anderen Spezies werden empfohlen.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, um ein Gleichgewicht zwischen Epitoperhaltung und Signalintensität zu finden; die Oberflächenfärbung kann mildere Bedingungen erfordern.
• In der Durchflusszytometrie (FC) titrieren Sie das -Konjugat, um eine optimale Trennung der IgM-positiven B-Zell- oder Plasmablast-Populationen zu erreichen, und verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen.
Aufgrund der großen Größe des pentameren IgM sollten Sie eine schonende Zellbehandlung in Betracht ziehen und harshes Zentrifugieren vermeiden, das IgM-Komplexe stören könnte.

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