Kaninchen anti-Human/Affe IgM mAb - P01871-1

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: IgM-Funktion und Lokalisierung

• Isoform 1 der schweren konstanten Kette von Immunglobulin mu (IGHM) bildet die Fc-Region von sezerniertem IgM (sIgM). Sie enthält C-terminale Segmente, die für die Polymerisierung und Effektor-Interaktionen entscheidend sind.
• sIgM multimerisiert überwiegend zu Pentameren und gelegentlich zu Hexameren, was eine hochavide Antigenbindung ermöglicht. Zugehörige Referenzen: PMID:32029689, PMID:37095205
• Natürliche sIgM sind polyreaktiv und erkennen konservierte Strukturen von körpereigenen und pathogenen Quellen, während immun-sIgM antigenspezifisch sind und nach Pathogenexposition induziert werden; beide sind für eine effiziente humorale Immunität unerlässlich.
• Die Fc-Region vermittelt Effektorfunktionen, einschließlich der hochaffinen Bindung an den Fc-Rezeptor FCMR auf lymphoiden Zellen, fördert neutralisierende IgG-Antworten und Selbsttoleranz sowie die Rekrutierung von Komplement C1q zur Aktivierung des klassischen Signalwegs. Zugehörige Referenzen: PMID:12847249, PMID:19006321, PMID:28230186
• sIgM trägt zur Beseitigung apoptotischer Zellen bei, indem es mit C1q und Mannose-bindendem Lektin zusammenarbeitet, um die Makrophagen-Phagozytose zu verstärken. Zugehörige Referenzen: PMID:12847249, PMID:19006321, PMID:28230186
• Bei der mukosalen Immunität wird sIgM via PIGR durch das Epithel transzytiert und mit der sekretorischen Komponente sezerniert, um nach Pathogenen zu suchen; IgM-Antigen-Komplexe unterlaufen eine FCMR-vermittelte Retrotranszytose durch M-Zellen zur Antigenpräsentation. Zugehörige Referenzen: PMID:32029689
• Subzelluläre Lokalisierung: Sezerniert; es fungiert extrazellulär im Plasma, auf Schleimhautoberflächen und in interstitiellen Flüssigkeiten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 218–453 innerhalb der konstanten Region von humanem IgM, was darauf hindeutet, dass der Antikörper ein lineares Epitop erkennt, das im Fc-Teil konserviert ist; bestätigen Sie die Reaktivität sowohl bei sezerniertem als auch bei membrangebundenem IgM in Ihrem System.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC und IF-P) ist eine Permeabilisierung möglicherweise nicht erforderlich, um oberflächenexprimiertes IgM nachzuweisen, aber Fixierung und Permeabilisierung können bei Bedarf für die intrazelluläre Färbung verwendet werden.
• Titrieren Sie den Antikörper in der Durchflusszytometrie, um die optimale Konzentration für Ihren Zelltyp zu bestimmen, und verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen sowie Fc-Block, um unspezifische Bindungen zu minimieren.
• Stellen Sie sicher, dass die Instrumentierung für den Nachweis von (Anregungs-/Emissionsmaxima ~490/515 nm) ausgestattet ist und validieren Sie das Färbemuster mit bekannten IgM-positiven und -negativen Zelllinien oder Gewebeschnitten.
• Kreuzreaktivität mit Cynomolgus-IgM wurde berichtet; überprüfen Sie die Leistung unter Ihren spezifischen experimentellen Bedingungen und Zell-/Gewebetypen.

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