Kaninchen-anti-humaner/-Affen-HLA-DR-mAb für FC – P01903

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von HLA-DRA

• HLA-DRA kodiert die Alpha-Kette des MHC-Klasse-II-Moleküls HLA-DR, die sich mit der Beta-Kette (HLA-DRB) paart, um Antigene gegenüber CD4+-T-Zellen zu präsentieren und adaptive Immunreaktionen einschließlich der Antikörperproduktion und Makrophagenaktivierung auszulösen.
  Verwandte Literatur:
  PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• Es präsentiert extrazelluläre Peptidantigene mit einer Länge von 10–30 Aminosäuren, die durch lysosomale Proteolyse endozytierter Antigene entstehen; ein großer hydrophober Ankerrest an Position 1 des Peptids ist für die stabile Bindung an MHC II entscheidend.
  Verwandte Literatur:
  PMID:8145819
• In Tumoren präsentiert HLA-DR antigene Peptide, die aus phagozytierten apoptotischen Tumorzellen oder durch Makropinozytose sezernierter Tumorproteine hervorgehen, und prägt dadurch die Antitumorimmunität.
  Verwandte Literatur:
  PMID:31495665
• Die Makroautophagie schließt intrazelluläre Proteine in Autolysosomen ein; ihre Peptide werden anschließend durch HLA-DR präsentiert. Dieser Prozess ist für die Selektion von T-Zellen im Thymus und die zentrale Toleranz von Bedeutung.
  Verwandte Literatur:
  PMID:17182262 PMID:23783831
• Es existieren zwei Modi der Epitopselektion: „zuerst binden, später schneiden/kürzen“ für pathogenabgeleitete Antigene und „zuerst schneiden, später binden“ für Selbstpeptide, was die Immundominanz beeinflusst.
  Verwandte Literatur:
  PMID:25413013
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst die Zellmembran, das endoplasmatische Retikulum, frühe und späte Endosomen, Lysosomen und Autolysosomen und spiegelt den dynamischen Transport während der Antigenverarbeitung wider.
• Die Gewebeexpression ist auf professionelle antigenpräsentierende Zellen (Makrophagen, dendritische Zellen, B-Zellen) und thymische Epithelzellen beschränkt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören N-glykosylierung, Disulfidbindungen, Isopeptidbindungen und ubiquitinähnliche Konjugationen, die die Stabilität von MHC II und die Peptidbeladung modulieren.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• ist ein helles, photostabiles Fluorophor, das direkt an den Antikörper konjugiert ist; ein sekundäres Nachweisreagenz ist nicht erforderlich, wodurch der unspezifische Hintergrund in der Durchflusszytometrie minimiert wird.
• Dieser monoklonale Kaninchenantikörper richtet sich gegen die nahezu konstante HLA-DRA-Kette und eignet sich daher als pan-HLA-DR-Marker für Immunzellen des Menschen und des Javaneraffen.
• Für eine optimale Färbung sollte der Antikörper im relevanten Zelltyp titriert werden, um die Konzentration zu bestimmen, die eine maximale Trennung zwischen positiven und negativen Populationen ergibt. Geeignete Isotypkontrollen und bei Bedarf eine Fc-Blockierung einschließen.
• Validieren Sie das Färbepanel mit Einkanal-Kontrollen und Fluorescence-minus-one-(FMO-)Kontrollen, um eine genaue Kompensation und Gating-Strategie sicherzustellen, insbesondere bei Mehrfarbenexperimenten.
• Erwägen Sie, die Zellen nach der Färbung mit einem kompatiblen Fixiermittel zu fixieren, um die Fluoreszenz und Probenstabilität für spätere Analysen zu erhalten.

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