Kaninchen-anti-Human/Affen-CD64-mAb für die Durchflusszytometrie - P12314

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD64 (FcγRI)

• CD64, auch als hochaffiner Immunglobulin-Gamma-Fc-Rezeptor I (FcγRI) bezeichnet, ist ein wichtiger Membranrezeptor, der mit hoher Affinität an die Fc-Region von IgG-Antikörpern bindet. Beim Menschen wird er durch das FCGR1A-Gen codiert und auch als FCG1, FCRI oder IGFR1 bezeichnet.
• Funktionell spielt CD64 eine zentrale Rolle sowohl in der angeborenen als auch in der adaptiven Immunität, indem er IgG-Effektorfunktionen vermittelt, einschließlich der Aktivierung der antikörperabhängigen zellulären Zytotoxizität (ADCC) gegen virusinfizierte Zellen auf Monozyten und Makrophagen.
• Als Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie enthält CD64 extrazelluläre immunglobulinähnliche Domänen, die eine spezifische IgG-Bindung ermöglichen und zum Verschlingen und zur Beseitigung von Immunkomplexen beitragen.
• Der Rezeptor wird überwiegend auf der Zellmembran von Monozyten und Makrophagen exprimiert. Seine Gewebespezifität ist auf diese phagozytischen Zelllinien beschränkt, wodurch er einen zuverlässigen Marker für diese Zellpopulationen darstellt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen von CD64 gehören Glykosylierung, Phosphorylierung und Disulfidbrückenbildung, die für die Rezeptorstabilität, Ligandenbindung und intrazelluläre Signalübertragung wichtig sind. Das Protein unterliegt alternativem Spleißen, wodurch Isoformen mit potenzieller funktioneller Vielfalt entstehen.
• Die CD64-Expression wird bei Infektionen und entzündlichen Erkrankungen hochreguliert, was seine wesentliche Beteiligung an der Immunüberwachung und Immunantwort widerspiegelt. Außerdem wurde CD64 mit verschiedenen Autoimmun- und Entzündungserkrankungen in Verbindung gebracht.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das für diesen Antikörper verwendete Immunogen umfasst die Aminosäuren 16–288, die der extrazellulären Domäne von CD64 entsprechen. Dieses Design deutet darauf hin, dass der Antikörper für den Nachweis des nativen Zelloberflächenrezeptors in Anwendungen der Durchflusszytometrie geeignet sein könnte.
• Bei Durchflusszytometrie-Experimenten sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Färbekonzentration für den jeweiligen Probentyp, beispielsweise menschliches Vollblut oder isolierte PBMCs, zu bestimmen, da die Färbeeffizienz variieren kann.
• Da CD64 auf Monozyten und Makrophagen beschränkt exprimiert wird, sollte die Färbespezifität durch geeignete Kontrollen validiert werden, beispielsweise durch Isotypkontrollen, Fc-Blockierungsreagenzien und einen Vergleich mit bekannten Monozytenmarkern wie CD14.
• Bei der Arbeit mit Proben des Javaneraffen sollte die Kreuzreaktivität unter den jeweiligen experimentellen Bedingungen überprüft werden, auch wenn für den Antikörper eine Reaktivität angegeben ist, da die Epitopkonservierung geringfügig von der des Menschen abweichen kann.

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