Kaninchen Anti-Human/Affe CD4 monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P01730

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD4-Funktion und -Lokalisation

• CD4 ist ein 51 kDa Typ I Transmembranglykoprotein und Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie, das vier extrazelluläre Ig-ähnliche Domänen, eine einzelne Transmembranhelix und einen cytoplasmatischen Schwanz enthält, der die Signaltransduktion vermittelt.
• Als Korezeptor für MHC-Klasse-II-Moleküle bindet CD4 gleichzeitig mit dem T-Zell-Rezeptor (TCR) an Peptid-MHC-Klasse-II-Komplexe auf antigenpräsentierenden Zellen, rekrutiert die Tyrosinkinase LCK zum TCR-CD3-Komplex und initiiert die nachgeschaltete Signalgebung, die für die Aktivierung, Proliferation und Differenzierung von T-Helferzellen erforderlich ist.
• Hoch exprimiert auf T-Helferzellen, kommt CD4 auch auf anderen Immunzellen wie Makrophagen, dendritischen Zellen und natürlichen Killerzellen vor, wo es zur Differenzierung, Zytokinexpression und Zellmigration beiträgt.
• CD4 dient als primärer Rezeptor für HIV-1 und ermöglicht den Viruseintritt in Wirtszellen (PubMed:12089508, PubMed:16331979, PubMed:2214026). Verwandte Referenzen: PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026
• Das HIV-1 Vpu-Protein zielt auf CD4 ab, um es abzubauen, reguliert seine Oberflächenexpression herunter und fördert so die virale Pathogenese (PubMed:17346169). Verwandte Referenzen: PMID:17346169
• Zusätzlich fungiert CD4 als Rezeptor für Humanes Herpesvirus 7 (HHV-7) (PubMed:7909607). Verwandte Referenzen: PMID:7909607
• Posttranslationale Modifikationen von CD4 umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Interketten-Disulfidbindungen, Palmitoylierung des cytoplasmatischen Schwanzes und Phosphorylierung, die seine Stabilität, Membranassoziation und Signalgebungskapazität modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihr Durchflusszytometrie-Experiment zu bestimmen; ein typischer Ausgangspunkt ist 0,1–1 µg pro 1×10^6 Zellen.
• Fügen Sie geeignete Isotypenkontrollen hinzu, um unspezifische Bindung zu bewerten und Gating-Schwellenwerte festzulegen.
• Vermeiden Sie eine Überfixierung von Zellen mit Paraformaldehyd, da dies das Epitop verändern kann; verwenden Sie bei Bedarf frisch hergestelltes 2% PFA für 15 min bei Raumtemperatur.
• Sorgen Sie für eine Einzelzellsuspension und filtern Sie Proben vor der Aufnahme durch einen 70 µm Zellfilter, um Verstopfungen zu verhindern.
• Validieren Sie die Färbung in relevanten biologischen Proben (z. B. humanen PBMCs, Javaneraffen- oder Rhesusaffen-Lymphozyten), um die erwarteten Expressionsmuster zu bestätigen.

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