Kaninchen anti-Human/Affe CD4 monoklonaler Antikörper für FC - P01730

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD4-Funktion und Lokalisation

• CD4 ist ein 51 kDa großes Typ-I-Transmembranglykoprotein aus der Immunglobulin-Superfamilie, auch bekannt als T4 oder Leu-3.
• Es fungiert als Korezeptor für MHC-Klasse-II-Moleküle, bindet gleichzeitig mit dem T-Zell-Rezeptor (TCR) und MHC-Klasse-II auf antigenpräsentierenden Zellen, was zur Rekrutierung von LCK und nachgeschalteter Signalgebung führt.
• CD4 ist essentiell für die Entwicklung von T-Helferzellen im Thymus und treibt die Differenzierung von Monozyten zu Makrophagen auf TCR/LCK-unabhängige Weise an.
• Hoch exprimiert auf T-Helferzellen, kommt CD4 auch auf Makrophagen, dendritischen Zellen und NK-Zellen vor und vermittelt Adhäsion und Migration.
• CD4 ist der primäre Rezeptor für HIV-1 und erleichtert den Viruseintritt in Wirtszellen (PubMed:12089508, PubMed:16331979, PubMed:2214026). Verwandte Referenzen: PMID:12089508, PMID:16331979, PMID:2214026
• Das HIV-1 Vpu-Protein reguliert die CD4-Expression herunter, um Immunantworten zu umgehen (PubMed:17346169). Verwandte Referenzen: PMID:17346169
• CD4 dient auch als Rezeptor für Humanes Herpesvirus 7 (HHV-7) (PubMed:7909607). Verwandte Referenzen: PMID:7909607
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung, Palmitoylierung und Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper zielt auf die extrazelluläre Domäne von CD4 ab, was ihn für die Durchflusszytometrie an lebenden Zellen ohne Permeabilisierung geeignet macht.
• Der -Fluorophor wird durch den 488-nm-Laser angeregt und emittiert im grünen Kanal (typischerweise FITC/GFP-Filtersatz); überprüfen Sie die Kompatibilität mit Ihrer Zytometerkonfiguration.
• Führen Sie eine Titration des Antikörpers durch, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre experimentellen Bedingungen zu ermitteln.
• Verwenden Sie geeignete Isotypenkontrollen und Fluoreszenz-minus-eins (FMO)-Kontrollen, um Gating-Strategien festzulegen und Hintergrundfärbung zu bewerten.
• Die CD4-Expression variiert zwischen T-Zell-Subsets und Aktivierungszuständen; validieren Sie den Antikörper in Ihrem System unter Verwendung von gut charakterisierten positiven und negativen Zellpopulationen.
• Da CD4 der HIV-Rezeptor ist, vermeiden Sie die Verwendung von Zelllinien oder primären Zellen, die HIV enthalten, da dies die Antikörperbindung beeinträchtigen oder CD4 herunterregulieren könnte.
• Falls eine intrazelluläre Färbung erforderlich ist, testen Sie die Leistung des Antikörpers nach Fixierung und Permeabilisierung, da diese Schritte die Epitoperkennung beeinflussen können.
• Es wird berichtet, dass der Antikörper mit Cynomolgus-Affen-CD4 kreuzreagiert; führen Sie für andere Spezies ein Validierungsexperiment durch.

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