Kaninchen anti-Human/Affe CD20 monoklonaler Antikörper für FC - P11836

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD20-Funktion und -Lokalisation

• CD20 (B-Lymphozyten-Antigen CD20) ist ein B-Zell-spezifisches Transmembranprotein aus der Unterfamilie A der membranspannenden 4-Domänen (MS4A), kodiert durch das MS4A1-Gen. Alternatives Spleißen kann mehrere Isoformen erzeugen.
• Es fungiert als Komponente eines speichergesteuerten Calciumkanals (SOC) und reguliert den Calciumeinstrom nach B-Zell-Rezeptor (BCR)-Aktivierung, was für die B-Zell-Entwicklung, -Differenzierung und -Aktivierung essentiell ist.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:12920111
  PMID:3925015
  PMID:7684739
  PMID:18474602
• CD20 ist in der Zellmembran lokalisiert und wird spezifisch auf B-Lymphozyten exprimiert, jedoch nicht auf Vorläufer-B-Zellen oder Plasmazellen, was es zu einem Schlüsselmarker für die B-Zell-Identifizierung macht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Palmitoylierung und Phosphorylierung, die seine Membranassoziation und Aktivität regulieren können. Es enthält auch Disulfidbrücken und ist ein Lipoprotein.
• CD20 ist ein etabliertes pharmazeutisches Ziel; monoklonale Antikörper gegen CD20 (z.B. Rituximab) werden bei der Behandlung von B-Zell-Malignomen und Autoimmunerkrankungen eingesetzt, was seine klinische Relevanz unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus den Aminosäuren 100-200 von humanem CD20, das wahrscheinlich die große extrazelluläre Schleife zwischen den Transmembrandomänen 3 und 4 umfasst. Dies deutet darauf hin, dass der Antikörper eine extrazelluläre Epitope erkennt, was ihn für die Durchflusszytometrie an lebenden, unfixierten Zellen geeignet macht.
• Für die Durchflusszytometrie verwenden Sie den Antikörper in einer optimalen Verdünnung, die durch Titration an humanen oder Javaneraffen-Peripheren mononukleären Blutzellen (PBMCs) oder CD20-exprimierenden B-Zelllinien bestimmt wird. Sorgen Sie für eine ordnungsgemäße Fc-Rezeptor-Blockierung und schließen Sie geeignete Isotypenkontrollen ein.
• Wenn der Antikörper in konjugierter Form vorliegt (z.B. -Farbstoff), kann er direkt für die Ein-Schritt-Färbung verwendet werden. Wenn er unkonjugiert ist, wird ein fluorophor-markierter anti-Kaninchen-Sekundärantikörper für den Nachweis benötigt.
• Erwägen Sie eine Multiplex-Analyse mit anderen B-Zell-Markern (z.B. CD19, CD21), um B-Zell-Subpopulationen in Immunphänotypisierungspanels zu charakterisieren.

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