Kaninchen anti-Human/Affe CD16 mAb für FC - P08637/O75015

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD16-Funktion und -Lokalisierung

• CD16A (FCGR3A) ist ein Rezeptor mit niedriger Affinität für den Fc-Fragment von IgG, der optimal durch gruppierte Antigen-IgG-Komplexe aktiviert wird, um eine antikörperabhängige zelluläre Zytotoxizität (ADCC) auszulösen.
  Verwandte Referenzen: PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369
• Der Rezeptor bindet nicht an freies monomeres IgG, was eine unangemessene Immunaktivierung in Abwesenheit einer antigenen Herausforderung verhindert.
  Verwandte Referenzen: PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369
• Auf natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) vermittelt CD16A die IgG-Effektorfunktionen und löst die Zytokinproduktion (z. B. IFNG) und Degranulation aus, um Virusinfektionen zu bekämpfen.
  Verwandte Referenzen: PMID:24412922, PMID:25786175
• CD16A trägt zur Entstehung von gedächtnisähnlichen adaptiven NK-Zellen bei, die zur effizienten, ADCC-vermittelten Eliminierung von virusinfizierten Zellen fähig sind.
  Verwandte Referenzen: PMID:24412922, PMID:25786175
• Der Rezeptor reguliert das Überleben und die Proliferation von NK-Zellen, indem er die Apoptose von NK-Zell-Vorläufern verhindert.
  Verwandte Referenzen: PMID:29967280, PMID:9916693
• Die Signalübertragung über ITAM-haltige Adapter aktiviert PI3K und erhöht das intrazelluläre Kalzium, was die NK-Zell-Aktivierung, Degranulation oder die Produktion proinflammatorischer Zytokine in Abhängigkeit vom Phosphorylierungsstatus des Rezeptors antreibt.
  Verwandte Referenzen: PMID:1825220, PMID:23024279, PMID:2532305
• CD16A kostimuliert NK-Zellen und kann die Lyse von Zielzellen unabhängig von der IgG-Bindung auslösen.
  Verwandte Referenzen: PMID:10318937, PMID:23006327
• Der Rezeptor vermittelt die antitumoralen Aktivitäten therapeutischer Antikörper, insbesondere solcher mit afucosylierten Fc-Domänen, durch Verstärkung der ADCC und Opsonisierung.
  Verwandte Referenzen: PMID:27670158, PMID:34485821, PMID:28566370
• CD16A ist ein Transmembran-Glykoprotein, das auf der Zellmembran lokalisiert ist und sezerniert werden kann; es wird auf NK-Zellen und einer Teilpopulation von zirkulierenden Monozyten exprimiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die extrazelluläre Domäne (aa 20-208) sowohl von FCGR3A als auch von FCGR3B ab, was darauf hindeutet, dass der Antikörper ein konserviertes Epitop erkennen könnte, das zwischen diesen beiden CD16-Isoformen gemeinsam ist. Erwägen Sie, die Isoformspezifität in Ihrer Zielzellpopulation zu verifizieren.
• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie das -Konjugat, um die optimale Färbekonzentration unter Verwendung relevanter Zelllinien oder primärer Zellen, die bekanntermaßen CD16 exprimieren (wie NK-Zellen oder Monozyten), zu bestimmen.
• Da CD16A von der Zelloberfläche abgespalten wird, schließen Sie geeignete Kontrollen ein (z. B. Isotypkontrolle, unstimulierte vs. stimulierte Proben) und erwägen Sie die Bewertung sowohl der Oberflächen- als auch der intrazellulären Färbung, wenn eine Sekretion ein Anliegen ist.
• Eine Kreuzreaktivität mit Javaneraffen wurde berichtet, validieren Sie jedoch die Reaktivität in Ihrem spezifischen Javaneraffen-Zelltyp oder Gewebe von Interesse vor der Verwendung.

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