Kaninchen-anti-Human-/Affen-CD14-mAb für FC – P08571

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD14

• CD14 (Monozytendifferenzierungsantigen CD14, My23) ist ein glykosylphosphatidylinositol-(GPI)-verankertes Glykoprotein, das zur Superfamilie der Leucin-reichen Wiederholungen (LRR) gehört.
• Es fungiert als Korezeptor für bakterielles Lipopolysaccharid (LPS), bindet monomeres LPS gemeinsam mit LBP und übergibt es an den TLR4/MD-2-Komplex, wodurch die Aktivierung der angeborenen Immunität ausgelöst wird. Verwandte Literatur: PMID:1698311, PMID:20133493, PMID:22265692, PMID:23264655
• Die nachgeschaltete Signalübertragung wird durch MyD88, TIRAP und TRAF6 vermittelt und führt zur Aktivierung von NF-κB sowie zur Sekretion proinflammatorischer Zytokine. Verwandte Literatur: PMID:8612135
• CD14 dient außerdem als Korezeptor für TLR2/TLR1- und TLR2/TLR6-Heterodimere, erkennt jeweils triacylierte und diacylierte Lipopeptide und vermittelt die Signalübertragung von der Zelloberfläche, gefolgt von der Weiterleitung zum Golgi-Apparat über einen von Lipid-Rafts abhängigen Weg. Verwandte Literatur: PMID:16880211
• Es bindet elektronegatives LDL (LDL(-)) und vermittelt die durch modifiziertes LDL induzierte Zytokinfreisetzung, wodurch der Lipidstoffwechsel mit Entzündungsreaktionen verbunden wird. Verwandte Literatur: PMID:23880187
• CD14 ist überwiegend auf der Zellmembran lokalisiert, in Membran-Rafts angereichert und auch im Golgi-Apparat nachweisbar; eine lösliche Form wird sezerniert.
• Es wird stark auf Monozyten und Gewebemakrophagen und schwach auf Granulozyten exprimiert und dient als wichtiger Oberflächenmarker zur Identifizierung von Monozyten/Makrophagen.
• Das Protein enthält intrakettäre Disulfidbrücken und wird posttranslational durch N-Glykosylierung modifiziert, was zu seiner strukturellen Stabilität und seinen Ligandeninteraktionen beiträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Konzentration für den jeweiligen Zelltyp und die jeweiligen Färbebedingungen zu bestimmen.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und, wenn möglich, „Fluorescence Minus One“-(FMO)-Kontrollen, um die Hintergrundfärbung zu beurteilen.
• Dieser Antikörper erkennt CD14 auf mononukleären Zellen des peripheren Blutes von Menschen und Cynomolgus-Affen; bestätigen Sie die Reaktivität in Ihrer Zielprobe.
• Das Immunogen (AS 20–352) deckt die extrazelluläre Domäne von CD14 ab, was auf eine mögliche Erkennung sowohl der GPI-verankerten membrangebundenen als auch der löslichen Form hindeutet.
• Stellen Sie sicher, dass die Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokolle mit dem ABflo®-647-Fluorophor kompatibel sind, falls eine intrazelluläre Färbung erforderlich ist.

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