Kaninchen-anti-human-β2-Mikroglobulin-mAb für die Durchflusszytometrie – P61769

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des β2-Mikroglobulins

• Beta-2-Mikroglobulin (B2M) ist ein nicht glykosyliertes Protein mit einer Molekülmasse von 13 kDa, das als unveränderliche leichte Kette von MHC-Klasse-I-Molekülen fungiert und für die Antigenpräsentation an zytotoxische T-Zellen unerlässlich ist.
• Als Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie enthält B2M eine immunglobulinähnliche Domäne und ist auf der Zelloberfläche nichtkovalent mit der α-Kette von MHC I assoziiert.
• B2M wird als Präprotein synthetisiert, durch Abspaltung des Signalpeptids in die reife Form überführt und konstitutiv in verschiedenen Geweben exprimiert, was seine grundlegende Rolle bei der Immunüberwachung widerspiegelt.
• Auf subzellulärer Ebene befindet sich B2M überwiegend als Bestandteil des MHC-I-Komplexes auf der Zelloberfläche und liegt außerdem in sezernierter Form in Körperflüssigkeiten vor.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, darunter Glykierung, Disulfidbrückenbildung und die Bildung von Pyrrolidoncarbonsäure am N-Terminus, die für seine Stabilität und Funktion wichtig sind.
• Exogen appliziertes M. tuberculosis EsxA oder EsxA-EsxB bindet an B2M und beeinträchtigt dessen Transport zur Zelloberfläche, wodurch die Antigenpräsentation über MHC-Klasse I möglicherweise beeinträchtigt wird. Dies könnte einen Mechanismus der Immunflucht darstellen. Zugehörige Referenz: PMID:25356553
• Mutationen im B2M-Gen wurden mit Amyloidose und anderen Erkrankungen in Verbindung gebracht, was seine klinische Bedeutung bei Erkrankungen der Proteinaggregation unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Der Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Immunogen erzeugt, das die Aminosäuren 21–119 des humanen B2M umfasst und damit die reife extrazelluläre Domäne einschließt. Daher erkennt er wahrscheinlich die native Konformation auf lebenden Zellen und ist für die Durchflusszytometrie geeignet.
• Für die durchflusszytometrische Analyse von β2-Mikroglobulin auf der Zelloberfläche kann dieses -Konjugat direkt in einem geeigneten Puffer verdünnt verwendet werden. Ein Standardfärbeprotokoll für mononukleäre Zellen des peripheren Blutes oder Lymphozytenzelllinien kann eingesetzt werden.
• Bestimmen Sie die optimale Antikörperkonzentration durch Titration im relevanten experimentellen System und schließen Sie geeignete Isotypkontrollen ein, um die Spezifität sicherzustellen.
• Da B2M ein löslicher Faktor ist, können Überstände oder Plasma mithilfe bead-basierter Durchflussassays analysiert werden. Die Leistung dieses Antikörpers in solchen Assays wurde jedoch nicht spezifisch getestet.

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