Kaninchen anti-Mensch TIGIT Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q495A1

Kern-Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TIGIT

• TIGIT (T-Zell-Immunorezeptor mit Ig- und ITIM-Domänen), auch bekannt als VSIG9, VSTM3 oder WUCAM, ist ein inhibitorischer Rezeptor der Immunglobulin-Superfamilie.
• Es unterdrückt die T-Zell-Aktivierung durch Förderung der Bildung von reifen immunregulatorischen dendritischen Zellen. Zugehörige Referenzen: PMID:19011627
• Nach der Bindung an PVR/CD155 oder NECTIN2/CD112 auf antigenpräsentierenden Zellen übermittelt TIGIT inhibitorische Signale durch Rekrutierung von Src-Kinasen, GRB2 und SHIP1 zur Hemmung der PI3K/MAPK-Signalwege und assoziiert mit Beta-Arrestin-2 zur Unterdrückung der NF-kappa-B-Signalgebung über TRAF6. Zugehörige Referenzen: PMID:23154388 PMID:24817116
• TIGIT fungiert auch als Rezeptor für NECTIN4 und hemmt die Zytotoxizität von NK-Zellen. Zugehörige Referenzen: PMID:32503945
• Es ist an der Zellmembran lokalisiert, was mit seiner Rolle bei der Modulation der Immun-Synapse übereinstimmt.
• TIGIT wird in geringen Mengen auf peripheren Gedächtnis- und regulatorischen CD4+-T-Zellen sowie NK-Zellen exprimiert und nach Aktivierung hochreguliert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Phosphorylierung; das Protein enthält eine Disulfidbindung und eine ITIM-Domäne.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Dieser -konjugierte Antikörper ist für die direkte Durchflusszytometrie konzipiert; verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und optimieren Sie die Titration für Ihren spezifischen Zelltyp und Aktivierungszustand.
• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Region (AS 22-141), was die Erkennung von oberflächenexprimiertem TIGIT auf lebenden Zellen gewährleistet.
• Da TIGIT nach der T-Zell- und NK-Zell-Aktivierung hochreguliert wird, sollten Sie die Zellen vor der Färbung stimulieren (z. B. mit anti-CD3/CD28), um die Detektion zu verbessern.
• Überprüfen Sie bei mehrfarbigen durchflusszytometrischen Panels die Kompensationseinstellungen mit einfach gefärbten Kontrollen und fügen Sie Vitalitätsfarbstoffe hinzu, um tote Zellen auszuschließen.
• Bestätigen Sie das Molekulargewichtsbandenmuster (~18 kDa Kern, ~26 kDa glykosyliert), wenn Sie eine komplementäre Western-Blot-Validierung durchführen.

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