Kaninchen anti-Human T-bet/Tbx21 monoklonaler Antikörper für intrazelluläre Durchflusszytometrie - Q9UL17

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von T-bet/Tbx21

• T-bet (TBX21) ist der maßgebliche Transkriptionsfaktor für die Verpflichtung zur Th1-Zelllinie. Er initiiert die Th1-Entwicklung durch Aktivierung von Th1-spezifischen Genprogrammen und gleichzeitiger Unterdrückung von Th2- und Th17-Genprogrammen. Verwandte Referenzen: PMID:10761931

• Er aktiviert direkt die Genexpression von IFNG und CXCR3 durch Rekrutierung von Chromatin-Remodeling-Komplexen, einschließlich SWI/SNF, das KDM6B und SMARCA4 enthält, welche eine permissive Chromatintopologie herstellen. Verwandte Referenzen: PMID:33296702

• T-bet rekrutiert den Super-Elongationskomplex (SEC), der CDK9 und Cyclin T1 enthält, zu Super-Enhancern und fördert die transkriptionelle Elongation von Th1-assoziierten Genen. Verwandte Referenzen: PMID:27292648

• Er unterdrückt alternative T-Helfer-Zell-Schicksale: Er blockiert die Th17-Differenzierung durch Hemmung der RUNX1-vermittelten Aktivierung von RORC und unterdrückt Th2-Zytokine (IL-4, IL-5, IL-13) durch Herabregulierung von GATA3 und NFATC2.

• T-bet schützt Th1-Zellen davor, aberrante Typ-I-Interferon-Reaktionen in IFN-gamma-reichen Umgebungen zu verstärken, indem er als Repressor von Typ-I-IFN-Transkriptionsfaktoren und ISGs wirkt.

• Er ist für die ordnungsgemäße Entwicklung von natürlichen Killerzellen (NK) und mukosa-assoziierten invarianten T-Zellen (MAIT) erforderlich. Verwandte Referenzen: PMID:33296702

• T-bet lokalisiert im Zellkern und unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die intrazelluläre Färbung dieses nukleären Ziels stellen Sie sicher, dass ein robustes Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokoll verwendet wird, das auf Transkriptionsfaktoren optimiert ist. Erwägen Sie, verschiedene Permeabilisierungspuffer zu testen, um ein Gleichgewicht zwischen Epitop-Zugänglichkeit und Morphologieerhaltung zu finden.
• Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre experimentellen Bedingungen zu ermitteln; Fügen Sie einen geeigneten Isotyp-Kontrolle und eine Fluoreszenz-minus-eins (FMO) Kontrolle ein, um den Hintergrund zu bewerten.
• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (aa 322–535) von humanem T-bet, was bei der Erkennung sowohl der Volllänge als auch potenzieller Spleißvarianten helfen kann, aber die Kreuzreaktivität mit anderen T-box-Familienmitgliedern sollte in Ihrem Assay-System überprüft werden.

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