Kaninchen-anti-humaner-Siglec-8-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – Q9NYZ4

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Siglec-8

• Siglec-8 (Sialinsäure-bindendes Ig-ähnliches Lektin 8), auch als SAF-2 (Mitglied 2 der Sialoadhäsin-Familie) bekannt, ist ein Transmembranrezeptor, der zur Familie der Siglecs von Sialinsäure-bindenden Lektinen gehört und vom SIGLEC8-Gen (GeneID: 27181) kodiert wird.
• Es fungiert als mutmaßliches Adhäsionsmolekül, das die sialinsäureabhängige Bindung an Blutzellen vermittelt. Es bindet bevorzugt an α-2,3-verknüpfte Sialinsäure und in geringerem Maße an α-2,6-verknüpfte Sialinsäure. Die Bindungsstelle kann durch Cis-Interaktionen mit Sialinsäuren auf derselben Zelloberfläche maskiert sein. Verwandte Referenzen: PMID:10625619 PMID:10856141
• Es erkennt Glyk epitop e, die eine terminale N-Acetylneuraminsäure (Sialinsäure) und eine darunterliegende 6-O-sulfatierte Galaktose enthalten, mit einer starken Präferenz für 6-O-sulfatierte Sialyl-Lewis-X-Strukturen. Verwandte Referenzen: PMID:27357658
• Das Protein weist mehrere immunglobulinähnliche Domänen, eine Transmembranhelix und einen zytoplasmatischen Schwanz auf. Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen mit vorhergesagten Molekulargewichten von 44, 46 und 54 kDa, was mit seiner reifen glykosylierten Form übereinstimmt.
• Siglec-8 ist in der Plasmamembran lokalisiert und wird spezifisch auf Blutzellen exprimiert, insbesondere auf Basophilen, Mastzellen und Eosinophilen, wodurch es zu einem wichtigen Marker für diese Zelllinien wird.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören N-Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die für die strukturelle Stabilität und die Ligandenerkennung essenziell sind. Die dreidimensionale Struktur wurde experimentell bestimmt (PDB verfügbar), wobei die Architektur seiner Lektindomäne hervorgehoben wird.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Sialinsäure-Bindungsdomäne (AS 17–363), daher wird dieser Antikörper wahrscheinlich native Konformationen erkennen – verwenden Sie ihn vorzugsweise für die Oberflächenfärbung in der Durchflusszytometrie.
• Für die Durchflusszytometrie (FC) mit humanen Proben validiert; für andere Anwendungen (z. B. Western Blot, IHC) wird eine laborinterne Optimierung, einschließlich Antigen-Retrieval und geeigneter Blockierungsbedingungen, empfohlen.
• Aufgrund der eingeschränkten Expression auf Eosinophilen, Mastzellen und Basophilen sollten geeignete Positivkontrollen (z. B. gereinigte Eosinophile oder Zelllinien) sowie Isotypkontrollen einbezogen werden, um die Spezifität zu bestätigen.
• Titrieren Sie den Antikörper, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen, da die Siglec-8-Expressionsniveaus zwischen verschiedenen Zelltypen variieren können.

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