Kaninchen anti-Mensch Siglec-8 Monoklonaler Antikörper für FC – Q9NYZ4

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Siglec-8

• Siglec-8 (Sialinsäure-bindendes Ig-ähnliches Lektin 8), auch als Sialoadhesinfamilienmitglied 2 (SAF-2) bezeichnet, ist ein Mitglied der Sialoadhesinfamilie der Lektine.
• Es handelt sich um ein vermutetes Adhäsionsmolekül, das die sialinsäureabhängige Bindung an Blutzellen vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:10625619 PMID:10856141
• Siglec-8 bindet bevorzugt an α-2,3-verknüpfte Sialinsäure und in geringerem Maße an α-2,6-verknüpfte Sialinsäure; cis-Wechselwirkungen auf derselben Zelloberfläche können die Bindungsstelle verdecken. Verwandte Referenzen: PMID:10625619
• Es erkennt terminale N-Acetylneuraminsäure (Sialinsäure mit einem darunterliegenden 6-O-sulfatierten Galaktose und zeigt eine Präferenz für Gal-6-sulfatierte Sialyl-Lewis X-Glykan-Epitope. Verwandte Referenzen: PMID:27357658
• Das Protein ist ein einzelpassiger Typ-I-Membranglykoprotein, das Immunglobulin-ähnliche Domänen, ein Signalpeptid und eine Transmembranhelix enthält; es weist Disulfidbindungen und potenzielle Glykosylierungsstellen auf.
• Die Expression ist stark auf Blutzellen beschränkt, hauptsächlich auf Basophile, Mastzellen und Eosinophile.
• Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen mit vorhergesagten Molekulargewichten von 44 kDa, 46 kDa und 54 kDa.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen (extrazelluläre Domäne, AS 17–363) deutet darauf hin, dass der Antikörper die membrannahe Region von humanem Siglec-8 erkennt; erwägen Sie die Überprüfung von Zelloberflächenfärbung versus intrazellulärer Färbung in Ihrem Assay.
• Da es sich um einen direkt konjugierten -Antikörper handelt, ist kein sekundärer Färbeschritt erforderlich; sorgen Sie für geringe Lichteinstrahlung und fixieren Sie Zellen bei Bedarf für die Durchflusszytometrie.
• Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihre spezifische Probenart zu bestimmen; typische Startverdünnungen liegen zwischen 1:50 und 1:200, dies sollte jedoch empirisch validiert werden.
• Verwenden Sie eine geeignete Isotypkontrolle, die mit dem gleichen Fluorophor konjugiert ist, um die Hintergrundbindung zu bewerten.
• Die Expression von Siglec-8 ist auf Basophile, Mastzellen und Eosinophile beschränkt – cofärben Sie mit Linienmarkern (z. B. CD45, CD3, CD19, CD16, CD123, HLA-DR), um Zellpopulationen zu bestätigen.
• Für die Vollblutfärbung erwägen Sie eine Lyse roter Blutkörperchen oder eine Dichtegradiententrennung zur Anreicherung von Leukozyten und validieren Sie Gating-Strategien mit bekannten Positiv- und Negativkontrollen.

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