Kaninchen-anti-humaner-PCSK9-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – Q8NBP7

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PCSK9

• PCSK9 ist eine Proprotein-Konvertase vom Subtilisin/Kexin-Typ 9, auch bekannt als NARC-1, die die Cholesterinhomöostase im Plasma reguliert, indem sie an Mitglieder der LDL-Rezeptorfamilie bindet und deren Abbau fördert. Zugehörige Referenzen: PMID:18039658
• Es wirkt über einen nicht-proteolytischen Mechanismus, um den Abbau des hepatischen LDLR über einen clathrinvermittelten Weg zu verstärken, wobei LDLR möglicherweise zu den Lysosomen geleitet wird. Zugehörige Referenzen: PMID:17461796, PMID:18197702, PMID:18799458
• PCSK9 hemmt außerdem den APOB-Abbau über den Autophagosom-/Lysosom-Weg und reguliert die Beseitigung von BACE1. Zugehörige Referenzen: PMID:18660751
• Es moduliert die neuronale Apoptose, indem es die Konzentrationen von LRP8/APOER2 verändert, und hemmt die ENaC-vermittelte Na+-Absorption, indem es die Oberflächenexpression von ENaC reduziert.
• Es ist im Zytoplasma lokalisiert, wird sezerniert und kommt in Endosomen, Lysosomen, an der Zelloberfläche, im endoplasmatischen Retikulum und im Golgi-Apparat vor.
• PCSK9 wird als Zymogen synthetisiert und durchläuft eine autokatalytische Spaltung; zu den weiteren posttranslationalen Modifikationen gehören Glykosylierung, Phosphorylierung, Sulfatierung und Disulfidbrückenbildung.
• Eine Gewebeexpression wurde in Neuroepitheliomen, Kolonkarzinomen, hepatischen und pankreatischen Zelllinien sowie Schwann-Zellen berichtet.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Dieser Antikörper ist für die intrazelluläre Durchflusszytometrie vorgesehen. Daher müssen die Zellen vor der Färbung fixiert und permeabilisiert werden. Optimieren Sie Ihr Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokoll für den jeweiligen Zielzelltyp.
• Das Immunogen (Aminosäuren 31–692 des humanen PCSK9) umfasst die Prodomäne und die katalytische Domäne. Daher kann der Antikörper sowohl vollständige als auch gespaltene PCSK9-Formen nachweisen. Validieren Sie den Nachweis im relevanten biologischen Kontext.
• Da es sich um einen direkt konjugierten -Antikörper handelt, ist kein Sekundärantikörper erforderlich. Dies vereinfacht den Färbeprozess und reduziert den Hintergrund.
• Titrieren Sie den Antikörper in Ihrem Assay, um die optimale Konzentration zu bestimmen. Ein typischer Ausgangsbereich für konjugierte Antikörper in der Durchflusszytometrie liegt bei 0,125–1 µg pro einer Million Zellen, sollte jedoch empirisch überprüft werden.
• Dieser Antikörper wurde an humanen Proben validiert; eine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht getestet.
• Schließen Sie geeignete Kontrollen ein (Isotypkontrolle, unstimulierte Probe) und ziehen Sie in Betracht, die Spezifität durch einen siRNA-Knockdown oder eine Blockierung mit rekombinantem PCSK9 zu bestätigen.

CamelBio: Ihre zentrale Beschaffungsplattform

CamelBio ist Ihr zentraler Beschaffungspartner für Rohstoffe für die In-vitro-Diagnostik (IVD) und unterstützt Hersteller diagnostischer Produkte sowie Forschende von der Konzeptphase bis zur klinischen Anwendung. Für die Entwicklung von PCSK9-zielgerichteten Assays und Studien zum Cholesterinstoffwechsel bieten wir validierte Antikörperpaare, optimierte monoklonale und polyklonale Antikörper sowie ergänzende Reagenzien in Großmengen. Unser globales Netzwerk ermöglicht zudem die Beschaffung schwer auffindbarer Rohstoffe für seltene und neu aufkommende Zielstrukturen.