Kaninchen Anti-Mensch Megalin/LRP2 Monoklonaler Antikörper für IF-P und FC (intrazellulär) - P98164

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Megalin/LRP2

• Megalin (LRP2) ist ein 521 kDa großes transmembranes Glykoprotein des Typs I, das zur Familie der Low-Density-Lipoprotein-Rezeptoren gehört und mehrere ligandenbindende Wiederholungen sowie EGF-ähnliche Domänen enthält.
• Es fungiert als multiligand endozytischer Rezeptor, hauptsächlich an der apikalen Oberfläche von Epithelzellen, und vermittelt die Aufnahme von Lipoproteinen, Vitaminen, Hormonen und Arzneimitteln in Zusammenarbeit mit Cubilin.
• Vermittelt die Endozytose und den Transport von Leptin über die Blut-Hirn-Schranke und innerhalb von Nervenzellen, was zur hypothalamischen Leptinsignalisierung und zur Regulation des Körpergewichts beiträgt (nach Ähnlichkeit).
• In der Niere vermittelt es die renale Rückresorption von 25-Hydroxyvitamin D3, das an GC/DBP gebunden ist, und beseitigt an Metallothionein gebundene Schwermetalle. Zugehörige Referenzen: PMID:15126248
• Spielt eine entscheidende Rolle für die Nierenhomöostase durch Internalisierung des Selenoproteins SEPP1 für die Selenaufnahme und des antiapoptotischen Proteins BIRC5/Survivin für die funktionelle Integrität. Zugehörige Referenzen: PMID:23825075
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst die apikale Zellmembran, das Endosomenlumen und beschichtete Vertiefungen; es ist auch in neuronalen Dendriten und Axonen vorhanden, was auf eine Rolle beim polarisierten Transport hinweist.
• Es ist essenziell für die embryonale Entwicklung, einschließlich des Neuralrohrverschlusses über die folatrezeptorvermittelte Aufnahme und die Regulation der Sonic-Hedgehog-Signalisierung.
• Es wird überwiegend in resorbierenden Epithelien wie den proximalen Nierentubuli und zytotrophoblasten der Plazenta exprimiert, was eine Bedeutung für den Transport von Nährstoffen und Steroidhormonen hat.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist der C-terminalen zytoplasmatischen Domäne (AA 4446-4655) zugeordnet, wodurch der Antikörper für den Nachweis intrazellulärer Epitope nach Permeabilisierung geeignet ist.
• Stellen Sie für die Immunfluoreszenz (IF-P) eine ausreichende Permeabilisierung (z. B. mit Triton X-100) sicher, damit der Antikörper Zugang zur intrazellulären Domäne hat.
• Optimieren Sie für die intrazelluläre Durchflusszytometrie (FC intra) die Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte, um die Antigenität zu erhalten; erwägen Sie die Verwendung eines Kernhüllenmarkers für das Gating.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Mäuse-Megalin, was Studien in Mausmodellen ermöglicht; führen Sie jedoch eine erste Validierung in Ihrem spezifischen Gewebe oder Zelltyp durch.
• Aufgrund der großen Größe des Proteins (521 kDa) bestätigen Sie die Spezifität mit Knockdown (siRNA), Knockout oder Blockierungpeptid-Kontrollen.
• Verwenden Sie ihn zusammen mit Anti-Cubilin-Antikörpern für Kolokalisationsstudien, da beide Rezeptoren an endozytischen Prozessen im proximalen Tubulus beteiligt sind.

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