Kaninchen-anti-human-LAMP2-monoklonaler Antikörper für die intrazelluläre Durchflusszytometrie – P13473

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von LAMP2

• LAMP2 (lysosomenassoziiertes Membran-Glykoprotein 2, auch bekannt als CD107b, LGP-96) ist ein stark glykosyliertes Transmembranprotein vom Typ I und ein Mitglied der LAMP-Familie, zu der auch LAMP1 und LAMP3 gehören.
• LAMP2 spielt eine zentrale Rolle bei der Lysosomenbiogenese, der Regulation des lysosomalen pH-Werts und der Autophagie. Es hemmt direkt den Protonenkanal TMEM175 und erleichtert dadurch die Lysosomenazidifizierung, die für die Aktivität von Hydrolasen unerlässlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:37390818
• Es vermittelt die chaperonvermittelte Autophagie (CMA), indem es zytosolische Proteine (z. B. GAPDH, GPX4, NLRP3, MLLT11) erkennt und bindet, die von Chaperonen wie HSPA8 präsentiert werden, und sie zum lysosomalen Abbau leitet. Verwandte Referenzen: PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:36586411
• LAMP2 ist für die Fusion von Autophagosomen und Lysosomen während der Makroautophagie erforderlich. Es akkumuliert STX17 auf Autophagosomen und gewährleistet den Abbau autophagischer Fracht. Verwandte Referenzen: PMID:27628032
• LAMP2 trägt zur MHC-Klasse-II-vermittelten Präsentation exogener Antigene bei, indem es die lysosomale Proteolyse und die Peptidbeladung unterstützt, ist jedoch für die Präsentation endogener Antigene entbehrlich. Verwandte Referenzen: PMID:15894275, PMID:20518820
• Während einer mikrobiellen Infektion unterstützt LAMP2 die FURIN-vermittelte Spaltung des Fusionsproteins F des Mumpsvirus, indem es sowohl mit FURIN als auch mit dem unverarbeiteten viralen Protein interagiert.
• Auf subzellulärer Ebene lokalisiert LAMP2 in lysosomalen, endosomalen und autophagosomalen Membranen sowie in der Zellmembran und in zytoplasmatischen Vesikeln.
• LAMP2 wird alternativ gespleißt und erzeugt drei Isoformen (LAMP-2A, -2B, -2C) mit unterschiedlichen Gewebeexpressionsmustern: LAMP-2A ist in Plazenta, Lunge und Leber reichlich vorhanden; LAMP-2B und -2C sind breiter verteilt. Verwandte Referenzen: PMID:26856698, PMID:7488019

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die luminale Domäne (AS 29–375) des humanen LAMP2 und gewährleistet die Erkennung extrazellulärer/luminaler Epitope, die auf der lysosomalen Membran exponiert sind. Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie sollten Sie eine Permeabilisierung und Fixierung der Zellen in Betracht ziehen, um den Zugang des Antikörpers zu den lysosomalen Kompartimenten zu ermöglichen.
• Aufgrund der Lokalisation von LAMP2 sollten geeignete Isotypkontrollen verwendet und die Färbung in relevanten Probensystemen validiert werden (z. B. in humanen Zelllinien, die LAMP2 exprimieren).
• Bei mehrfarbiger Durchflusszytometrie ist eine minimale spektrale Überlappung mit sicherzustellen; titrieren Sie den Antikörper, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.
• Dieser Antikörper ist für den Menschen validiert; die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht getestet. Überprüfen Sie daher bei Bedarf die Eignung in Modellorganismen.

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