Kaninchen anti-Human IL-6R/CD126 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie (Intrazellulär) - P08887

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IL-6R/CD126 Funktion und Lokalisierung

• Die Interleukin-6-Rezeptor-Untereinheit Alpha (IL-6R, CD126/gp80) ist ein Transmembran-Glykoprotein, das als membrangebundene Form und als lösliches Isoform (sIL6R) vorkommt, das durch alternatives Spleißen und proteolytisches Abschälen entsteht.
  Verwandte Referenzen: PMID:28060820

• Der membrangebundene IL-6R bindet Interleukin-6 (IL-6) mit niedriger Affinität; die Signaltransduktion erfordert die Assoziation mit dem gp130-Korezeptor, um JAK/STAT-, MAPK- und andere Wege zu aktivieren und Immunreaktionen, Akutphasenreaktionen und Hämatopoese zu regulieren. Die klassische Signalgebung über den membrangebundenen IL-6R ist überwiegend regenerativ und anti-entzündlich, wobei die Expression hauptsächlich auf Hepatozyten und bestimmte Leukozyten-Teilmengen beschränkt ist.
  Verwandte Referenzen: PMID:28265003, PMID:30995492, PMID:31235509

• Der lösliche IL-6R (sIL6R) wirkt als Agonist, indem er einen IL-6:sIL6R-Komplex bildet, der an gp130 auf Zellen ohne membrangebundenen IL-6R bindet und so die IL-6-Trans-Signalisierung ermöglicht. Die Trans-Signalisierung ist pro-entzündlich, trägt zu chronischen entzündlichen Krankheiten bei, induziert die VEGF-Produktion und reguliert den Energie- und Glukose-Haushalt im zentralen Nervensystem.
  Verwandte Referenzen: PMID:21990364, PMID:12794819

• Bei der Cluster-Signalisierung aktivieren membrangebundene IL-6:IL-6R-Komplexe auf einer Zelle das gp130 auf benachbarten Zellen; dieser Modus wird von dendritischen Zellen genutzt, um die Th17-Differenzierung von naiven CD4⁺-T-Zellen zu fördern.

• IL-6R wird auf peripheren Blutzellen und Hepatozyten exprimiert; sIL6R ist in niedrigen Konzentrationen in Serum und Urin nachweisbar. Etwa 1–20 % des Plasma-sIL6R stammen aus alternatives Spleißen.
  Verwandte Referenzen: PMID:28060820

• Die extrazelluläre Region enthält immunglobulinähnliche Domänen und ein Zytokinrezeptor-Homologie-Modul, das durch Disulfidbrücken stabilisiert wird. Das Protein unterliegt einer N-Glykosylierung, die für die Ligandenbindung und Rezeptorstabilität wichtig ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Domäne (aa 20–358); der Antikörper kann sowohl den membrangebundenen IL-6R als auch sIL6R erkennen. Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie sollten Fixierung und Permeabilisierung optimiert werden, um intrazelluläre Rezeptorbestände zu erfassen und gleichzeitig den Hintergrund durch lösliche Formen zu minimieren.
• Wir empfehlen die Einbeziehung von IL-6R-Knockout- oder -Knockdown-Kontrollen, um die Färbespezifität in Ihrem experimentellen System zu bestätigen.
• Der -Direktkonjugat eliminiert Schritte mit sekundären Antikörpern und reduziert die Assay-Zeit; jedoch wird eine Titration empfohlen, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis in Ihrem spezifischen Zellmodell zu erreichen.
• Da sIL6R in Kulturüberständen oder Körperflüssigkeiten vorhanden sein kann, sorgen Sie nach der Färbung für gründliches Waschen, um ungebundene lösliche Rezeptor-Antikörper-Komplexe zu entfernen.

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