Kaninchen anti-humanes IgG (Fc) monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P01857

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von humanem IgG-Fc (IGHG1)

• IGHG1 kodiert die konstante Region der Immunglobulin-Gamma-1-Schwerkette, eine Schlüsselkomponente von IgG1-Antikörpern. Diese Region definiert den Isotyp und vermittelt Effektorfunktionen über das Fc-Fragment. Verwandte Referenzen: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• IgG1-Moleküle sind sezernierte Glykoproteine oder membrangebundene Rezeptoren auf B-Zellen. In der humoralen Immunität dient membrangebundenes Ig als B-Zell-Rezeptor und löst nach Antigenbindung die B-Zell-Aktivierung und Differenzierung zu Antikörper-sezernierenden Plasmazellen aus. Verwandte Referenzen: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• Die Fc-Region interagiert mit Fc-Rezeptoren auf angeborenen Immunzellen und Komplement-C1q, was antikörperabhängige zelluläre Zytotoxizität (ADCC), antikörperabhängige Phagozytose, komplementabhängige Zytotoxizität (CDC) und Entzündungsreaktionen auslöst. Verwandte Referenzen: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• Der Immunglobulin-Schwerketten-Lokus durchläuft V(D)J-Rekombination, somatische Hypermutation und Klassenwechsel-Rekombination, um diverse Antikörperrepertoires zu erzeugen, wobei IgG1 die am häufigsten vorkommende Unterklasse im menschlichen Serum ist.
• Das Protein enthält konservierte Immunglobulin-Domänen, die durch Disulfidbrücken stabilisiert sind, und ist an Asn-180 N-glykosyliert, was für die korrekte Faltung und Fc-Rezeptor-Bindung entscheidend ist.
• Subzellulär ist IgG1 entweder membrangebunden (über eine Transmembrandomäne) auf B-Zell-Oberflächen oder wird als löslicher Antikörper sezerniert; die Fc-Region vermittelt den Transport über epitheliale Barrieren via den neonatalen Fc-Rezeptor.
• IGHG1 befindet sich auf Chromosom 14 innerhalb des Ig-Schwerketten-Lokus und wird spezifisch in B-Zellen und Plasmazellen exprimiert; seine konstante Region wird während des Klassenwechsels von IgM/IgD ausgetauscht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 100-330 von humanem IgG1-Fc und umfasst die CH2- und CH3-Domänen, die über IgG1-Allotypen hinweg hochkonserviert sind. Stellen Sie bei der Verwendung dieses Antikörpers in der Durchflusszytometrie geeignete Kontrollen (z.B. IgG-Isotypkontrollen) sicher.
• Die typische Arbeitskonzentration für die Durchflusszytometrie sollte durch Titration optimiert werden; erwägen Sie die Verwendung von 0,5-5 µg pro Test für humanes Vollblut oder PBMCs.
• Dieser Antikörper ist spezifisch für humanes IgG-Fc; testen Sie auf Kreuzreaktivität mit anderen Spezies, wenn Mehrarten-Experimente geplant sind. Er bindet nicht an Fab-Fragmente.
• Um Fc-Rezeptor-vermittelten Hintergrund zu minimieren, blockieren Sie Zellen vor der Färbung mit Humanserum oder Fc-Block.
• Verwenden Sie nach der Färbung frische Paraformaldehyd-Fixierung (0,5-1 %), um die Fluoreszenz zu erhalten; vermeiden Sie Methanol, da es das Zielprotein denaturieren kann.

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