Kaninchen-anti-human-Flt3/CD135-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P36888

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Flt3/CD135

• Die rezeptorartige Tyrosin-Proteinkinase FLT3, die vom FLT3-Gen kodiert wird und auch als CD135, FLK-2, FLK2 oder STK1 bezeichnet wird, ist ein Zelloberflächenrezeptor, der zur Familie der Rezeptor-Tyrosinkinasen der Klasse III gehört.
• Sie fungiert als Rezeptor für das Zytokin FLT3LG und spielt eine entscheidende Rolle bei der Regulation der Differenzierung, Proliferation und des Überlebens hämatopoetischer Vorläuferzellen und dendritischer Zellen.
• Nach der Ligandenbindung aktiviert FLT3 durch die Phosphorylierung von Adapterproteinen und Kinasen wie SHC1, AKT1, MAPK1/ERK2, MAPK3/ERK1 und STAT5A/B nachgeschaltete Signalwege, einschließlich RAS/MAPK, PI3K/AKT/mTOR und STAT5.
• Mutationen, die eine konstitutive Kinaseaktivität verursachen, stehen mit hämatologischen Malignomen in Zusammenhang, da sie eine unkontrollierte Zellproliferation und Resistenz gegenüber Apoptose fördern.
• FLT3 befindet sich hauptsächlich auf der Zellmembran als Single-Pass-Transmembranprotein, wobei seine Ligandenbindungsdomäne extrazellulär und seine Kinasedomäne intrazellulär exponiert ist; außerdem wurde es im Lumen des endoplasmatischen Retikulums nachgewiesen.
• FLT3 wird stark im Knochenmark, in hämatopoetischen Stammzellen, myeloischen Vorläuferzellen sowie Granulozyten-/Makrophagen-Vorläuferzellen exprimiert. Es kommt außerdem in Leber, Thymus, Milz und Lymphknoten sowie in geringeren Mengen in Niere und Bauchspeicheldrüse vor; insbesondere bei T-Zell-Leukämie ist es überexprimiert.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Glykosylierung, Phosphorylierung, Disulfidbrückenbildung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität, Lokalisation und Aktivität regulieren.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, die möglicherweise die Rezeptorfunktion und gewebespezifische Expressionsmuster beeinflussen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Dieser monoklonale Antikörper ist für Anwendungen in der Durchflusszytometrie (FC) konzipiert. Führen Sie Titrationsexperimente durch, um die optimale Konzentration für Ihren Zelltyp und Versuchsaufbau zu bestimmen.
• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Domäne (AS 27-163), was darauf hindeutet, dass der Antikörper gegen die extrazelluläre Region von FLT3 gerichtet ist. Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Schritte zur Blockierung von Fc-Rezeptoren, um unspezifische Bindungen zu minimieren.
• Da FLT3 auf hämatopoetischen Vorläuferzellen und dendritischen Zellen exprimiert wird, sollten Sie bei der Zusammenstellung Ihres Durchflusszytometrie-Panels validierte positive Kontrollen (z. B. Leukämie-Zelllinien) und negative Kontrollen verwenden.
• Durch die direkte ABflo®-647-Konjugation ist kein Sekundärantikörper erforderlich, wodurch das Färbeprotokoll vereinfacht und möglicherweise der Hintergrund reduziert wird.

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