Kaninchen anti-Mensch EGFR mAb für IF/ICC, FC - P00533

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von EGFR

• EGFR (epidermaler Wachstumsfaktor-Rezeptor) gehört zur ErbB-Familie der Rezeptor-Tyrosinkinasen und ist auch als ErbB1 oder HER1 bekannt.
• Es bindet Liganden der EGF-Familie, darunter EGF, TGF-alpha, Amphiregulin (AREG), Epigen (EPGN), Betacellulin (BTC), Epiregulin (EREG) und heparinbindender EGF-ähnlicher Wachstumsfaktor (HBEGF). Dies führt zur Rezeptor-Homo- oder Heterodimerisierung und Autophosphorylierung an wichtigen zytoplasmatischen Resten. (PubMed:10805725, PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029) Zugehörige Referenzen: PMID:10805725, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Der phosphorylierte Rezeptor rekrutiert Adapterproteine wie GRB2 und initiiert mehrere nachgeschaltete Signalkaskaden, darunter die Module RAS-RAF-MEK-ERK, PI3-Kinase-AKT, PLCgamma-PKC und STATs. Es kann auch den NF-kappa-B-Signalweg aktivieren. (PubMed:27153536, PubMed:11116146) Zugehörige Referenzen: PMID:27153536, PMID:11116146
• EGFR phosphoryliert direkt andere Proteine wie RGS16 (Aktivierung seiner GTPase-Aktivität), MUC1 (Verstärkung der Interaktion mit SRC und CTNNB1/beta-Catenin) und CCDC88A/GIV (Förderung der Zellmigration durch Bindung von EGFR an der Zellmembran). (PubMed:11602604, PubMed:11483589, PubMed:20462955) Zugehörige Referenzen: PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:20462955
• Isoform 2 von EGFR kann als Antagonist der EGF-Wirkung fungieren.
• EGFR lokalisiert in mehreren zellulären Kompartimenten, darunter Zellmembran, Endoplasmatische Retikulum-Membran, Golgi-Apparat-Membran, Kernmembran, Endosomen und den Zellkern; es kann auch sezerniert werden.
• Es ist ubiquitär exprimiert, Isoform 2 wird auch bei Eierstockkrebs nachgewiesen.
• In Hepatozyten wirkt EGFR als Rezeptor für das Hepatitis-C-Virus (HCV) und erleichtert den viralen Eintritt, indem es die Bildung des CD81-CLDN1-Rezeptorkomplexes fördert und die Membranfusion verstärkt.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Dieser Antikörper zielt auf ein Epitop der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 335-525) ab und eignet sich daher für den Nachweis von oberflächenständigem EGFR in Anwendungen mit lebenden und fixierten Zellen wie Durchflusszytometrie und Immunfluoreszenz.
• Für die Durchflusszytometrie empfehlen wir, den Antikörper zu titrieren, um die optimale Konzentration zu bestimmen, und geeignete Isotypkontrollen einzusetzen, um die Spezifität sicherzustellen.
• Für die Immunfluoreszenz kann eine sanfte Fixierung mit Paraformaldehyd gefolgt von einer Permeabilisierung mit Triton X-100 oder Methanol verwendet werden; für den Nachweis von oberflächenständigem EGFR ist jedoch möglicherweise keine Permeabilisierung erforderlich.
• Da die Kreuzreaktivität nur für menschliches EGFR validiert wurde, sollten Nutzer die Reaktivität bei anderen Spezies oder interessierenden Probenarten selbst überprüfen.
• Wie bei jedem rekombinanten Antikörper sollten Sie Chargenkonsistenzprüfungen durchführen und eine Validierung im vorgesehenen Assaysystem vornehmen.

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