Kaninchen-anti-human-EGFR-mAb für FC - P00533

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des epidermalen Wachstumsfaktorrezeptors

• EGFR ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die Liganden der EGF-Familie bindet und dadurch Homo-/Heterodimerisierung, Autophosphorylierung sowie die Aktivierung mehrerer nachgeschalteter Kaskaden einschließlich der RAS-RAF-MEK-ERK-, PI3K-AKT-, PLCγ-PKC- und STAT-Module auslöst; außerdem moduliert er die NF-κB-Signalübertragung und phosphoryliert Substrate wie RGS16 und MUC1, um die Zellmigration und andere Prozesse zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029 PMID:11116146 PMID:11602604 PMID:11483589 PMID:20462955
• EGFR fungiert als Rezeptor für das Hepatitis-C-Virus (HCV) und erleichtert den Viruseintritt in Hepatozyten, indem er die Bildung des CD81-CLDN1-Rezeptorkomplexes fördert.
• Isoform 2 kann als Antagonist der EGF-Wirkung fungieren und möglicherweise die ligandabhängige Signalübertragung modulieren.
• Auf subzellulärer Ebene ist EGFR in der Zellmembran, der Membran des endoplasmatischen Retikulums, der Golgi-Membran, der Kernmembran und im Endosom lokalisiert und kann sezerniert werden; kleinere Mengen befinden sich im Zellkern.
• EGFR wird ubiquitär in verschiedenen Geweben exprimiert, wobei Isoform 2 auch in Ovarialkarzinomen nachgewiesen wird.
• Zu den wichtigsten posttranslationalen Modifikationen und Merkmalen gehören Phosphorylierung, Glykosylierung, Ubiquitinierung und Palmitoylierung, wie durch die UniProt-Schlüsselwörter hervorgehoben: Wirt-Virus-Interaktion, Protoonkogen, Tyrosin-Proteinkinase, Membranrezeptor, Transmembranprotein und Signalübertragung.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären ligandbindenden Domäne (AS 335–525) des humanen EGFR; der resultierende monoklonale Kaninchenantikörper erkennt wahrscheinlich natives EGFR auf der Zelloberfläche. Führen Sie für die Durchflusszytometrie eine Antikörpertitration durch und verwenden Sie Isotypkontrollen, um die Färbebedingungen zu optimieren.
• Dieses -Konjugat eignet sich für die Oberflächenfärbung lebender Zellen; wenn eine intrazelluläre Detektion erforderlich ist, validieren Sie geeignete Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokolle für Ihren Zelltyp.
• Da EGFR in vielen Geweben exprimiert wird, sollten Sie die Antikörperspezifität und das Signal-Rausch-Verhältnis in der gewünschten biologischen Probe (z. B. Krebszelllinien, primäre Hepatozyten) unter Ihren experimentellen Bedingungen bestätigen.
• Für Studien zum HCV-Eintritt sollten Sie den Antikörper zur Überwachung der EGFR-Expression auf von Hepatozyten abgeleiteten Zelllinien (z. B. Huh7) und zur Untersuchung seiner Rolle bei der Bildung des CD81-CLDN1-Komplexes einsetzen.

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