Kaninchen-anti-Mensch DC-SIGNR/CD299 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q9H2X3

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von DC-SIGNR

• DC-SIGNR (CD299), codiert durch das Gen CLEC4M, ist ein Transmembran-C-Typ-Lektin-Rezeptor vom Typ II. Alternatives Spleißen erzeugt sowohl membrangebundene als auch sezernierte Isoformen; das Protein wirkt bei der Immunüberwachung und Erkennung von Pathogenen mit.
• Es fungiert als Pathogenerkennungsrezeptor (PRR), der mannosehaltige Kohlenhydrate auf Pathogenen binden kann, deren Endozytose und anschließende Degradation in Lysosomen vermittelt. DC-SIGNR bindet außerdem ICAM3 auf T-Zellen und erleichtert so Immuninteraktionen.
• Es dient als Anheftungsrezeptor für ein breites Spektrum von Viren, darunter HIV-1, Hepatitis-C-Virus (HCV), SARS-CoV, Ebolavirus, Influenzavirus, humanes Coronavirus 229E, Cytomegalovirus, West-Nil-Virus, Japanisches Enzephalitisvirus und Marburgvirus – was seine Rolle in der viralen Pathogenese unterstreicht.
• Die Gewebeexpression findet sich überwiegend in lebersinusoidalen Endothelzellen, Lymphknoten, Plazentaendothel, Alveolarepithelzellen Typ II und Lungenendothelzellen. Es ist bemerkenswerterweise nicht in Makrophagen vorhanden, was es von seinem nahen Homolog DC-SIGN unterscheidet.
• Die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 71–399) enthält eine Tandemwiederholungsregion und eine C-Typ-Lektin-Kohlenhydrat-Erkennungsdomäne (CRD), die Mannosereste calciumabhängig bindet – dies ist entscheidend für die Interaktion mit Pathogenen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-gebundene Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die für die korrekte Faltung, Stabilität und Ligandenbindungsaktivität essenziell sind.
• Subzellulär ist DC-SIGNR hauptsächlich an der Plasmamembran lokalisiert, aber eine lösliche sezernierte Form, die durch alternatives Spleißen erzeugt wird, findet sich auch in extrazellulären Flüssigkeiten.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die gesamte extrazelluläre Domäne (AS 71–399), wodurch sichergestellt wird, dass der Antikörper die native Konformation und die Kohlenhydrat-Erkennungsdomäne von DC-SIGNR erkennt. Dadurch eignet er sich für den Nachweis sowohl von membrangebundenen als auch von sezernierten Formen.
• Verwenden Sie für die Durchflusszytometrie (FC) als Positivkontrolle beispielsweise menschliche lebersinusoidale Endothelzellen oder mit CLEC4M transfizierte Zelllinien. Fügen Sie einen passenden Isotypkontrolle und eine Fc-Rezeptorblockierung hinzu, um unspezifische Bindung zu minimieren.
• Das -Konjugat liefert eine helle Fluoreszenz mit minimaler Photobleichung; titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihre Zellen und Instrumenteneinstellungen zu bestimmen. Nehmen Sie eine korrekte Kompensation vor, wenn Sie ihn in Multifarben-Panels verwenden.
• Da DC-SIGNR abgespalten werden kann, untersuchen Sie bei Bedarf Oberflächenfärbung versus Gesamtfärbung mit Permeabilisierung, um intrazelluläre oder sezernierte Anteile zu erfassen.

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