Kaninchen anti-Mensch CLEC12A/CD371 Monoklonaler Antikörper für FC – Q5QGZ9

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CLEC12A

• CLEC12A (CD371, CLL-1, MICL) ist ein transmembranärer Rezeptor des Typs II mit einem Durchgang durch die Membran aus der Familie der C-Typ-Lektine. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• Funktioniert als myeloider inhibitorischer Rezeptor; nach Bindung eines Liganden wird sein ITIM-Motiv phosphoryliert, rekrutiert die Tyrosinproteinphosphatasen PTPN6 und PTPN11, um SYK-vermittelte Aktivierungssignale zu dämpfen und dadurch myeloide Zellantworten einschließlich Zytokinproduktion und Degranulierung zu unterdrücken. Zugehörige Referenzen: PMID:14739280, PMID:16239426, PMID:34234773
• Wirkt als Mustererkennungsrezeptor für verschiedene Liganden: erkennt DNA in neutrophilen extrazellulären Fallen (NETs), Monosodiumurat-Kristalle und pathogenassoziierte Moleküle wie Plasmodium-Hämozoin und mykobakterielle Mycolsäure, wodurch es mit antiinflammatorischer Rückkopplung und Wirtsabwehr verbunden ist. Zugehörige Referenzen: PMID:38367667, PMID:38386511, PMID:39143217, PMID:31269448, PMID:36542980
• Hemmt die Zytotoxizität natürlicher Killerzellen (NK-Zellen) und hemmt die Reifung dendritischer Zellen auf IL-10-abhängige Weise, was zur Immunhomöostase beiträgt. Zugehörige Referenzen: PMID:15238421, PMID:16239426
• Lokalisiert überwiegend auf der Zellmembran.
• Wird bevorzugt in lymphoiden Geweben und angeborenen/adaptiven Immunzellen exprimiert, einschließlich NK-Zellen, T-Zellen, dendritischen Zellen, Monozyten und Makrophagen; auf Proteinebene in Makrophagen-reicher roter Milz der Milz und Lymphknoten nachgewiesen. Zugehörige Referenzen: PMID:14739280, PMID:15238421, PMID:15548716, PMID:16239426, PMID:16838277
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen N-gebundene Glykosylierung und Phosphorylierung; die extrazelluläre Domäne enthält konservierte Disulfidbindungen, die für die strukturelle Integrität essenziell sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das verwendete Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aa 65-265) von humanem CLEC12A, die die C-Typ-Lektin-Domäne enthält und ausreicht, um Antikörper zu generieren, die den nativen Rezeptor auf lebenden Zellen erkennen.
• Dieses -Konjugat ist für die direkte Durchflusszytometrie (FC) ohne sekundären Antikörper optimiert; erwägen Sie eine Titrierung des Antikörpers, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihren Zelltyp und Ihre Färbebedingungen zu bestimmen.
• Für die Oberflächenfärbung von CLEC12A ernten Sie Zellen und waschen Sie mit FACS-Puffer (PBS mit 1–2 % FBS oder BSA). Inkubieren Sie mit dem fluoroform-konjugierten Antikörper 20–30 Minuten bei 2–8 °C, geschützt vor Licht.
• Verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und Fc-Rezeptor-Blockierungsreagenzien, um unspezifische Bindung zu minimieren, insbesondere bei myeloiden Zellpopulationen.
• Die Datenerfassung sollte so bald wie möglich nach der Färbung erfolgen; falls eine Verzögerung unvermeidbar ist, fixieren Sie die Zellen nach dem Waschen mit Paraformaldehyd und schützen Sie sie vor Licht.
• Vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen des Antikörpers; lagern Sie das Konjugat unverdünnt bei 2–8 °C und schützen Sie es vor längerer Lichteinwirkung.

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