Kaninchen anti-Human CD99 monoklonaler Antikörper für IF/ICC und FC - P14209

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD99-Antigenfunktion und -lokalisation

• Das CD99-Antigen (auch bekannt als MIC2, E2-Antigen, 12E7 oder T-Zell-Oberflächenglykoprotein E2) ist ein Transmembranprotein, das beim Menschen durch das CD99-Gen kodiert wird.
• Es fungiert bei T-Zell-Adhäsionsprozessen, einschließlich der spontanen Rosettenbildung mit Erythrozyten, ein Merkmal von T-Zellen.
• CD99 spielt eine kritische Rolle bei der Leukozyten-Extravasation und erleichtert den Durchtritt von Leukozyten durch die endotheliale Basalmembran in einem späten Schritt, wobei es unabhängig von PECAM1 wirkt.
• Das Protein befindet sich an der Plasmamembran (Single-Pass-Typ-I-Membranprotein), wobei sein N-Terminus extrazellulär exponiert ist.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Phosphorylierung (Schlüsselwörter: Glykoprotein, Phosphoprotein).
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und das Protein ist Teil des Referenzproteoms mit direkter Proteinsequenzierungsnachweis.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 24-123 von humanem CD99 überspannt und der N-terminalen extrazellulären Region entspricht. Dieses Design zielt wahrscheinlich auf ein exponiertes Epitop ab, das für Anwendungen zur Lebendzellfärbung geeignet ist.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) wird eine Fixierung mit Paraformaldehyd empfohlen, aber eine Permeabilisierung kann weggelassen werden, wenn das Epitop auf der Zelloberfläche zugänglich ist. Testen Sie die Färbung mit und ohne Detergens, um dies zu bestätigen.
• In der Durchflusszytometrie (FC) ermöglicht dieses -Konjugat eine direkte Detektion; erwägen Sie die Verwendung geeigneter Isotypkontrollen und eine Titration des Antikörpers für ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis.
• Validieren Sie die Spezifität des Antikörpers in Ihrem experimentellen System unter Verwendung von CD99-positiven Zelllinien (z. B. T-Zelllinien) und CD99-negativen Kontrollen, um eine minimale Kreuzreaktivität zu bestätigen.
• Da CD99 an der Adhäsion beteiligt ist, stellen Sie sicher, dass die Methoden zur Zellernte Oberflächenantigene nicht beschädigen; sanfte Ablösungstechniken werden empfohlen.

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