Kaninchen anti-humaner CD97 mAb für FC - P48960

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD97-Funktion und -Lokalisation

• Adhesion G protein-coupled receptor E5 (CD97, ADGRE5) ist ein Mitglied der Adhäsions-GPCR-Familie, charakterisiert durch eine große extrazelluläre Domäne mit EGF-ähnlichen Wiederholungen und einer Sieben-Transmembran-Domäne.
• Das Protein vermittelt sowohl Zelladhäsion als auch intrazelluläre Signalgebung und fungiert hauptsächlich früh nach der Leukozytenaktivierung, um die Migration zu regulieren.
• CD97 spielt eine wesentliche Rolle bei der Leukozytenmigration und erleichtert den Transport von Immunzellen zu Entzündungsherden.
• Es wird breit auf den meisten hämatopoetischen Zellen exprimiert, einschließlich aktivierter Lymphozyten, Monozyten, Makrophagen, dendritischer Zellen und Granulozyten, und ist auch reichlich auf glatten Muskelzellen vorhanden.
• Der Rezeptor ist in der Zellmembran lokalisiert und kann auch in löslicher Form in den extrazellulären Raum abgespalten werden; seine Expression wird unter entzündlichen Bedingungen hochreguliert, wie z.B. bei Multipler Sklerose und rheumatoider Arthritis.
• CD97 wird in verschiedenen Karzinomen (Schilddrüse, kolorektal, gastrisch, ösophageal, pankreatisch) exprimiert, was auf potenzielle Rollen in der Tumorbiologie hindeutet.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Phosphorylierung; das Protein enthält kalziumbindende EGF-ähnliche Domänen und Disulfidbrücken, die für seine Struktur entscheidend sind.
• Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen mit unterschiedlichem Molekulargewicht; die von UniProt annotierten Massen liegen bei etwa 92 kDa, was glykosylierte Formen widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde unter Verwendung der extrazellulären Region (aa 21-398) von humanem CD97 entwickelt, die die EGF-ähnlichen Domänen umfasst und wahrscheinlich den nativen, oberflächenexprimierten Rezeptor in der Durchflusszytometrie erkennt.
• Für die Durchflusszytometrie (FC) sollten Sie eine geeignete Lebend-/Tot-Unterscheidung und Fc-Rezeptor-Blockierung in Betracht ziehen, um unspezifische Bindung zu minimieren, insbesondere in Proben mit hoher FcγR-Expression wie Monozyten und Makrophagen.
• Validieren Sie den Antikörper im relevanten Proben-System (z.B. humane PBMCs, CD97-exprimierende Zelllinien) und schließen Sie geeignete Kontrollen ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Da CD97 abgespalten und in löslicher Form vorliegt, sollten Sie beachten, dass lösliches CD97 in der Probe (z.B. Serum, Synovialflüssigkeit) mit dem Nachweis der membrangebundenen Form konkurrieren könnte; erwägen Sie, Zellen vor der Färbung gründlich zu waschen.

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