Kaninchen anti-Human CD84 Monoklonaler Antikörper für IF/ICC und FC - Q9UIB8

Biologischer Hintergrund: CD84-Funktion und -Lokalisierung

• CD84 (SLAMF5) ist ein Mitglied der SLAM-Rezeptorfamilie, die sowohl angeborene als auch adaptive Immunantworten durch homo- oder heterotypische Zell-Zell-Interaktionen modulieren.
• Es fungiert als ein Selbstliganden-Rezeptor, und seine Signalgebung wird durch das Vorhandensein kleiner cytoplasmatischer Adapterproteine SH2D1A/SAP und SH2D1B/EAT-2 reguliert.
• Homophile Interaktionen von CD84 verstärken die Sekretion von Interferon-Gamma (IFNG) in Lymphozyten und induzieren die Thrombozytenstimulation über einen SH2D1A-abhängigen Weg.
• CD84 vermittelt die Zytotoxizität von natürlichen Killerzellen (NK-Zellen), abhängig von SH2D1A und SH2D1B (Nach Ähnlichkeit).
• Es dient als Marker für hämatopoetische Vorläuferzellen. Verwandte Referenzen: PMID:11564780, PMID:12115647, PMID:12928397
• In Mastzellen reguliert CD84 die Signalgebung des Rezeptors mit hoher Affinität für Immunglobulin-Epsilon negativ, unabhängig von SH2D1A und SH2D1B, unter Beteiligung von FES und PTPN6/SHP-1. Verwandte Referenzen: PMID:22068234
• CD84 reguliert die Makroautophagie in primären dendritischen Zellen positiv, indem es IRF8 stabilisiert und dessen TRIM21-vermittelten proteasomalen Abbau hemmt. Verwandte Referenzen: PMID:29434592
• Subzelluläre Lokalisierung: CD84 ist ein Zellmembranprotein, das vorwiegend in hämatopoetischen Geweben exprimiert wird, einschließlich Lymphknoten, Milz, peripheren Leukozyten, Makrophagen, B-Zellen, Monozyten, Thrombozyten, Thymozyten, T-Zellen und dendritischen Zellen.
• Das Protein unterliegt einem alternativen Spleißen, was zu mehreren Isoformen mit vorhergesagten Molekulargewichten von ca. 24-38 kDa führt. Es ist ein Glykoprotein mit Disulfidbrücken und Phosphorylierungsstellen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Verwenden Sie es direkt für die Durchflusszytometrie (FC) oder Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) ohne einen Sekundärantikörper, da der Antikörper vor-konjugiert mit ist.
• Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Versuchsaufbau zu bestimmen; typische Startverdünnungen für FC liegen bei 1:50-1:200, sollten aber empirisch bestätigt werden.
• Verwenden Sie für FC einen geeigneten Isotyp-Kontrolle (Kaninchen IgG1 ), um die unspezifische Bindung zu bewerten.
• Für IF/ICC wird eine Fixierung mit 4% Paraformaldehyd empfohlen; eine Permeabilisierung ist möglicherweise nicht für CD84 an der Zelloberfläche erforderlich, sollte aber getestet werden, wenn eine intrazelluläre Färbung gewünscht ist.
• Validieren Sie den Antikörper in humanen hämatopoetischen Zelllinien oder primären Immunzellen, von denen bekannt ist, dass sie CD84 exprimieren (z. B. Raji, THP-1 oder PBMCs).
• Da der Antikörper mehrere Isoformen erkennt, beachten Sie, dass die Färbungsintensität aufgrund der unterschiedlichen Isoformexpression je nach Zelltyp variieren kann.
• Vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen; lagern Sie bei 4°C lichtgeschützt.

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