Kaninchen-anti-human-CD79a-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie (intrazellulär) – P11912

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD79a

• CD79a, auch bekannt als Ig-alpha, MB-1 oder MB-1-Membranglykoprotein, ist die Alpha-Kette des mit dem B-Zell-Antigenrezeptorkomplex assoziierten Proteins. Es bildet ein Heterodimer mit CD79b und ist für die Expression und Funktion des B-Zell-Rezeptors (BCR) essenziell.
• Es kooperiert mit CD79b, um nach der Antigenbindung an den BCR die Signalkaskade zu initiieren. Dies führt zur Internalisierung des Komplexes, zum Transport zu späten Endosomen und zur anschließenden Antigenpräsentation.
• Es ist für die effiziente Differenzierung von Pro-B- und Prä-B-Zellen erforderlich, da es die Oberflächenexpression des BCR fördert. Sein Fehlen beeinträchtigt die frühe Entwicklung von B-Zellen.
• Es stimuliert die Autophosphorylierung und Aktivierung von SYK und bindet an BLNK. Dadurch wird BLNK in die Nähe von SYK gebracht und eine durch SYK vermittelte Phosphorylierung von BLNK ermöglicht, wodurch die nachgeschaltete Signalübertragung fortgesetzt wird.
• Es interagiert mit einigen Tyrosinkinasen der Src-Familie und erhöht deren Aktivität, wodurch das Signal weiter verstärkt wird. Umgekehrt unterdrückt es während der Entwicklung unreifer B-Zellen auch die BCR-Signalübertragung, um eine vorzeitige Aktivierung zu verhindern.
• Es befindet sich als Typ-I-Einfachtransmembranprotein in der Zellmembran. Seine immunrezeptor-tyrosinbasierten Aktivierungsmotive (ITAMs) im zytoplasmatischen Schwanz dienen als Andockstellen für Signalmoleküle.
• Es wird spezifisch in B-Zellen exprimiert, von den frühen Stadien der B-Zell-Entwicklung bis zu den reifen B-Zellen, in Plasmazellen jedoch herunterreguliert.
• Es durchläuft mehrere posttranslationale Modifikationen, darunter Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung, Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinierung. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 165–225, einer Region, die einen Teil der intrazellulären Domäne umfasst. Dieses Design unterstützt Anwendungen, die den Nachweis intrazellulärer Epitope erfordern, beispielsweise die intrazelluläre Durchflusszytometrie.
• Für die intrazelluläre Färbung sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle mit Standardreagenzien optimiert werden, beispielsweise eine Paraformaldehyd-Fixierung gefolgt von einer Permeabilisierung mit Saponin oder Digitonin. Die Validierung sollte in geeigneten B-Zelllinien (z. B. Raji, Daudi) oder primären humanen B-Zellen erfolgen.
• Der Antikörper wird für die Durchflusszytometrie (intrazellulär) empfohlen. Es kann auch eine Prüfung in anderen intrazellulären Anwendungen wie dem Western Blot unter reduzierenden Bedingungen in Betracht gezogen werden, wobei die vorhergesagten Molekulargewichte von 20 kDa und 25 kDa (isoformabhängig) zu beachten sind.

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