Kaninchen anti-Human CD68 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie (Intrazellulär) - P34810

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD68 (Makrosialin)

• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere CD68-Isoformen. CD68 ist ein stark glycosyliertes Transmembranprotein, das zur Familie der lysosomalen/endosomalen Membranglycoproteine (LAMP) gehört.
• CD68 spielt eine Schlüsselrolle bei den phagozytischen Aktivitäten von Gewebemakrophagen, sowohl im intrazellulären lysosomalen Stoffwechsel als auch bei extrazellulären Zell-Zell- und Zell-Pathogen-Interaktionen.
• Es bindet an gewebe- und organspezifische Lektine oder Selektine und erleichtert das Homing von Makrophagen-Subsets in bestimmte Gewebe.
• Die schnelle Rezirkulation von CD68 von Endosomen und Lysosomen zur Plasmamembran kann es Makrophagen ermöglichen, sich auf selektintragenden Substraten oder anderen Zellen fortzubewegen.
• Subzellulär lokalisiert CD68 hauptsächlich an Endosomen- und Lysosomenmembranen, kann aber auch auf der Zellmembran gefunden werden.
• Es wird stark in Blutmonozyten und Gewebemakrophagen exprimiert und ebenfalls in Lymphozyten, Fibroblasten, Endothelzellen und vielen Tumorzelllinien nachgewiesen, wo es bei der Ausbreitung helfen kann.
• Das Protein enthält ein Signalpeptid, eine Transmembrandomäne und mehrere Disulfidbrücken und unterliegt einer N-verknüpften Glycosylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da CD68 hauptsächlich in intrazellulären lysosomalen und endosomalen Kompartimenten lokalisiert ist, führen Sie vor der Färbung für die intrazelluläre Durchflusszytometrie entsprechende Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte durch.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in relevanten Makrophagen-Modellsystemen wie THP-1-abgeleiteten Makrophagen oder primären humanen Monozyten.
• Der -Fluorophor hat eine Anregung/Emission ähnlich wie Pacific Blue; stellen Sie daher sicher, dass Ihr Durchflusszytometer mit einem violetten Laser (z. B. 405 nm) und entsprechenden Detektionsfiltern (z. B. 450/50 BP) konfiguriert ist.
• Dieser Antikörper wurde gegen die extrazelluläre/luminale Domäne (aa 22-319) von humanem CD68 hergestellt, was sowohl Oberflächen- als auch intrazelluläre Proteinbestände zielen kann.

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