Kaninchen anti-Human CD68 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie (Intrazellulär) - P34810

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Makrosialin (CD68)

• CD68 (Makrosialin, Gp110) ist ein stark glycosyliertes Transmembranprotein, das zur Familie der lysosomalen/endosomalen Membranglycoproteine (LAMP) gehört.
• Es spielt eine Schlüsselrolle bei den phagozytischen Aktivitäten von Gewebemakrophagen, indem es am intrazellulären lysosomalen Stoffwechsel und an extrazellulären Interaktionen mit anderen Zellen und Pathogenen beteiligt ist.
• CD68 bindet an gewebe- und organspezifische Lektine oder Selektine und erleichtert so das Homing von Makrophagen an bestimmte Orte.
• Das schnelle Recycling von CD68 von Endosomen und Lysosomen zur Plasmamembran könnte es Makrophagen ermöglichen, sich auf selektintragenden Substraten fortzubewegen.
• Subzellulär lokalisiert CD68 hauptsächlich an endosomalen und lysosomalen Membranen, zirkuliert aber auch an die Zelloberfläche.
• Es ist stark in Blutmonozyten und Gewebemakrophagen exprimiert, mit geringerer Expression in Lymphozyten, Fibroblasten, Endothelzellen und vielen Tumorzelllinien.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, und das Protein enthält ein Signalpeptid, eine Transmembranhelix und luminale Domänen mit Disulfidbrücken.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen starke N-verknüpfte Glycosylierung, die zur scheinbaren Molekülmasse beiträgt (~110 kDa; Kernprotein ~37 kDa).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 22–319 von humanem CD68 und deckt einen wesentlichen extrazellulären/luminalen Teil ab. Berücksichtigen Sie dessen Relevanz für die Detektion sowohl von Oberflächen- als auch von intrazellulären Beständen nach entsprechender Permeabilisierung.
• Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie (FC intra) verwenden Sie Standardprotokolle zur Fixierung und Permeabilisierung (z. B. mit Saponin oder Digitonin), um dem Antikörper Zugang zu endosomalen/lysosomalen Kompartimenten zu ermöglichen.
• Validieren Sie diesen Antikörper in Ihrem spezifischen Probesystem (z. B. humane PBMCs, Gewebemakrophagen), um die Färbemuster und optimalen Titer zu bestätigen.
• Beachten Sie, dass der -Konjugat in stark glycosylierten oder autofluoreszierenden Zellen einen gewissen Hintergrund aufweisen kann; Fügen Sie entsprechende Isotypkontrollen und eine Fc-Rezeptor-Blockade hinzu.

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