Kaninchen anti-Human CD62E/E-Selectin Monoklonaler Antikörper für FC - P16581

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von E-Selectin

• E-Selectin (CD62E) ist ein Zelloberflächenglykoprotein, das zur Familie der Selektin-Adhäsionsmoleküle gehört und beim Menschen durch das SELE-Gen kodiert wird. Es ist auch als Endothelial-Leukozyten-Adhäsionsmolekül 1 (ELAM-1) und Leukozyten-Endothelzell-Adhäsionsmolekül 2 (LECAM2) bekannt.
• Seine Hauptfunktion besteht darin, die Adhäsion von Blutneutrophilen an cytokinaktivierte Endothelien zu vermitteln, ein wesentlicher Schritt der Entzündungsreaktion. Diese Interaktion erfolgt durch die Bindung an SELPLG/PSGL1 (P-Selectin-Glykoprotein-Ligand 1).
• Darüber hinaus kann E-Selectin zur kapillaren Morphogenese beitragen, was auf eine Rolle über die Immunadhäsion hinaus bei der Angiogenese oder Gefäßentwicklung hindeutet.
• Das Protein ist als Typ-I-Transmembranprotein in der Zellmembran lokalisiert und verfügt über einen extrazellulären Bereich, der eine N-terminale C-Typ-Lektindomäne, eine EGF-ähnliche Domäne und mehrere Sushi-(CCP/SCR)-Wiederholungen enthält.
• E-Selectin ist durch mehrere wichtige strukturelle Motive gekennzeichnet, darunter Kalziumbindungsstellen, Disulfidbrücken und N-verknüpfte Glykosylierung. Es benötigt Metallionen (insbesondere Kalzium) für die Ligandenerkennung.
• Die Expression von E-Selectin wird typischerweise auf Endothelzellen durch entzündungsfördernde Zytokine wie TNF-alpha und IL-1 induziert, ohne dass in den meisten Geweben eine konstitutive Expression vorliegt, was seine Rolle bei der akuten Entzündung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (aa 22–230) von humanem E-Selectin und umfasst die Lektin- und EGF-ähnlichen Domänen. Dies deutet darauf hin, dass der Antikörper wahrscheinlich die N-terminale Ligandenbindungsregion zielt, was ihn für die Blockierung oder Detektion von oberflächenexprimiertem E-Selectin geeignet macht.
• Als Fluorophor-konjugierter monoklonaler Antikörper ist dieses Reagenz einsatzbereit für die direkte Durchflusszytometrie ohne sekundäre Färbung. Es ist ratsam, den Antikörper zu titrieren, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihr spezifisches Zellsystem zu bestimmen.
• Die Expression von E-Selectin ist induzierbar; erwägen Sie die Stimulierung von Endothelzellen (z. B. HUVECs) mit TNF-α oder IL-1 für 4–6 Stunden vor der Färbung, um nachweisbare Oberflächenwerte zu erreichen.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Viabilitätsfarbstoffe, um die spezifische Bindung zu unterscheiden und tote Zellen von der Analyse auszuschließen.
• Lagern Sie den Antikörper bei 2–8°C, geschützt vor Licht; vermeiden Sie wiederholte Gefrier- und Auftauzyklen.

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