Kaninchen-anti-humaner-CD59-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – P13987

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD59

• CD59, auch bekannt als Protectin, MAC-inhibitorisches Protein (MAC-IP), Membran-Inhibitor der reaktiven Lyse (MIRL) und HRF-20, ist ein GPI-verankertes Glykoprotein, das auf menschlichen Zellen exprimiert wird.
• Es wirkt als potenter Inhibitor des Membranangriffskomplexes (MAC) des Komplementsystems und verhindert Schäden an Wirtszellen, indem es den Einbau mehrerer C9-Moleküle in die Pore blockiert (PubMed:11882685, PubMed:1698710, PubMed:2475111, PubMed:36797260).
• Zugehörige Referenzen: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111 PMID:36797260
• Eine lösliche Form von CD59 kommt im Urin vor. Sie behält ihre Komplementbindungsaktivität bei, weist jedoch eine deutlich verringerte Fähigkeit zur Hemmung des Zusammenbaus des MAC auf Zellmembranen auf.
• CD59 ist über einen Glykosylphosphatidylinositol-(GPI)-Anker auf der Zellmembran lokalisiert; es wird außerdem sezerniert.
• Mutationen im CD59-Gen stehen mit hereditärer hämolytischer Anämie in Zusammenhang und unterstreichen dessen wesentliche Rolle beim Schutz von Erythrozyten vor der komplementvermittelten Lyse.
• Das Protein unterliegt alternativem Spleißen und posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Disulfidbrückenbildung, Glykierung und Hinzufügung eines GPI-Ankers.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 26–101 des humanen CD59, einer für die Interaktion mit den Komplementkomponenten C8 und C9 wichtigen Region. Aufgrund des extrazellulären GPI-Ankers sollte für die Oberflächenfärbung die Verwendung intakter, lebender Zellen in Betracht gezogen werden.
• Für die Durchflusszytometrie sollten die optimalen Antikörperkonzentrationen empirisch bestimmt werden. Als Ausgangspunkt wird ein Verdünnungsbereich von 1:50–1:200 empfohlen. Bei Verwendung mehrerer Fluorophore sollten geeignete Isotyp- und Kompensationskontrollen eingeschlossen werden.
• Dieser Antikörper ist an konjugiert, das durch den violetten 405-nm-Laser angeregt und mit einem 450/50-nm-Bandpassfilter detektiert wird. Stellen Sie sicher, dass die Konfiguration Ihres Zytometers kompatibel ist.

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